细胞名称： 人单核细胞白血*（STR鉴定正确） thp1细胞

细胞别称： THP1; THP 1; THPI; THP-1(ATCC); O-THP-1; 

Tohoku Hospital Pediatrics-1

货号：TCH-C361

规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶

价格：1500元 (干冰运输需另加200元干冰费)

种属来源：人

组织来源：外周血

特征：急性单核细胞白血*

细胞形态：单核细胞样

生长特性：悬浮生长

培养体系：RPMI-1640+10%FBS+0.05 mM β-mercaptoethanol+1%P/S

配套培养基货号：TCH-G361

传代比例：1:3-1:6，每2-3天换液一次

传代周期：24-48 h

培养条件：气相：95%空气+5%CO2，温度：37℃

thp1细胞冻存条件：60%基础培养基+30%FBS+10%DMSO，液氮储存

质量检测：细菌、真菌、支原体检测均为阴性

  thp1细胞从一名1岁的急性单核细胞性白血*的男孩的外周血中分离建立。该细胞可以吞噬乳胶颗粒和激活的红细胞，细胞膜和胞浆内均没有免疫球蛋白，表达C3R和FcR；可受弗波酯TPA诱导向单核系方向分化；可作为转染宿主。

  thp1细胞培养要点 

人单核细胞白血*细胞（THP-1）培养注意要点

 1.  THP-1细胞为悬浮生长，部分细胞聚集成团，部分细胞分散；

 2. THP-1细胞更喜欢酸性环境，在偏酸性环境中，THP-1生长更快，所以 当培养基稍微变黄（呈橘红色）时，是适合细胞生长的，此时补液或半换液即可。

 3. THP-1细胞有密度依赖性，THP-1细胞密度低时，生长较慢，培养密度 维持在4 ~8×10 5 /mL为宜；超过2.0 ×10 6 /mL则需要传代。

 4. THP-1细胞对机械力较敏感。正常培养时，应尽量避免吹打力道过大。 暴力吹打会使细胞分化和死细胞增加。 

 5. 血清质量差异可能引起细胞状态变化，建议选用高质量的胎牛血清。 

人单核细胞白血*细胞（THP-1）换液方法：

 1. 补液法：培养基变黄时可补加适量（1~2mL）新鲜培养基，补加1-2次 之后，用离心的方式全部换液，离心1200rpm （约250g）3分钟。   2.半换液法：以T25瓶子为例，瓶子里装有5mL培养基。竖起瓶子静置一 段时间，待细胞沉底，小心吸出2.5mL的培养基，转移到离心管，离心1200rpm（约 250g）3分钟，检查有没有沉淀，以免损失细胞；原瓶补充2.5mL新鲜培养基， 离心管里若有细胞，则用新鲜培养基重悬后放回原瓶。 

3. 如果换液后第二天培养基就变得很黄，同时镜下检查未污染，说明细胞密度大，应该传代。

人单核细胞白血*细胞（THP-1）传代方法：

 1. 摇晃培养瓶，把细胞摇匀，均分到两个瓶子里，每瓶再补充等量培养基。 

 2. 离心法：离心后计数，按照40-50万细胞/mL的密度接种到T25瓶里，瓶中培养基量以5mL为宜。不方便计数时，按1:2比例传代。 

 3. 死细胞或细胞碎片较多的情况下，建议用离心法传代，离心转速可适当 降低（推荐800~1000rpm或160~200g）。 

 人单核细胞白血病细胞（THP-1）冻存方法

1. 由于THP-1是悬浮细胞，更易受到冻存影响，建议加大冻存密度，大约 200万-300万/mL为宜，以提高复苏存活率。 
2. THP-1细胞对冻存温度比较敏感，建议冻存后立即转入-80℃冰箱，长 期保存应放在液氮罐中。

 THP-1细胞复苏后通常需要3-5天恢复状态，建议复苏后48小时内不要 进行操作。

 人单核细胞白血病细胞（THP-1）常见问题及解决方法：

1.培养基里一定要加β-mercaptoethanol吗？

 β-mercaptoethanol 是一种常用的培养补充剂，有抗氧化的作用，可减少氧化应激对 THP-1细胞的影响。当细胞密度过大但需要维持时，可适当增加β-mercaptoethanol 的比 例（不超过标准量的1.5倍）。

2.悬浮细胞在镜下观察时，难以聚焦或估算密度怎么办？ 

  悬浮细胞会随着液体流动，不容易聚焦，静置5-10分钟使细胞沉底，之后再轻 轻放上显微镜观察，将有助于聚焦和估算细胞密度。 

3.THP-1细胞在培养过程中细胞发生聚团怎么办？ 

 少量细胞聚团，呈葡萄串状，属于正常现象，特别是细胞密度较低时，易出现这 种情况。更换血清品牌或增大血清比例（不超过20%）有助于解决聚团问题。不 建议将聚团的细胞吹散，等待密度高时，会自己分散开。 

4. THP-1细胞在培养过程中细胞发生贴壁怎么办？ 

  少量细胞贴壁属于正常情况，将细胞悬液转移至新瓶中即可。当贴壁细胞的比例 高于20%，说明细胞生长环境有异常，需排查培养箱设置、培养基成分，以及细胞培养瓶、三角摇瓶是否异常。

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