人脐带间充质干细胞诱导分化试剂盒

HyCyteTM 人脐带间充质干细胞诱导分化试剂盒

Human Umbilical Cord Marrow Mesenchymal Stem Cells Osteogenic Differentiation Kit 

货号：UCHX-D101 

规格：200 mL/Kit 

人脐带间充质干细胞诱导分化试剂盒产品性能稳定，可提高脐带/脐血间充质干细胞成骨/成脂/成软骨诱导效率；

NOTE：

a. 本产品组分均为无菌分装，可直接配制成完全培养基使用；染色液为独立包装组分，请勿与培养基混用。

 b. 配制完全培养基前，请瞬时离心各管小剂量试剂以免损失，配制后请在有效期内使用完毕。

 c. 完全培养基储存条件：2~8℃，避光；配制后有效期：3 months。

 d. 本产品仅用于科研实验，不可用于其他。

成骨诱导步骤

1. 接种诱导细胞：取对数生长期的细胞，按照2×10^4cells/cm2的细胞密度接种至包被后的培养器皿中，于37℃，5% CO2培养环境下培养至汇合度60-70%，弃掉上清，加入成骨诱导分化培养基。

2. 细胞分化诱导：每2-3天更换成骨诱导培养基，于37℃，5% CO2培养环境下培养约14-21天，并注意观察细胞形态变化。根据细胞钙盐结晶析出和钙质结节形成的情况，决定终止细胞诱导的时间，进行染色鉴定。

3. 细胞固定：吸去培养基使用适量1×PBS清洗一次，弃去后取适量4%中性甲醛溶液覆盖培养器皿底面，室温固定30-60 min，弃去固定液再使用1×PBS清洗两次。

4. 茜素红染色：加入适量茜素红染液染3~5min，吸去茜素红染液，用1×PBS清洗两次，并加入适量1×PBS避免细胞干燥。

5. 诱导评估：显微镜下观察成骨染色效果，并进行图像采集和诱导评估。诱导成功时，钙质结节会与茜素红染料结合后呈现红色或橘红色。