苏州阿尔法生物实验器材有限公司

18年专注生物实验室仪器设备&耗材综合供应

0512-6295610418934597460 /18020269905

生物实验室仪器设备 汇聚知楚、Rainin、博旅等国内外品牌
  • 抗体表达细胞株
抗体表达细胞株构建服务
CHO 细胞系基因组本身具有不稳定性。通常, 中国仓鼠体细胞的染色体为 11 对22 条, 而中国仓鼠卵巢细胞的染色体则发生了大面积不稳定重排重组现象, 不同细胞系染色体的数目也不恒定。基因组的不稳定性, 主要表现在其染色体层面上的拷贝数变异。
全国热线

0512-62956104

抗体表达细胞株构建服务

基于CHO 细胞的抗体表达

  抗体广泛存在于生物医学研究、创新药发展中, 且需求量大。然而, 满足国际市场日益增长的抗体需求量是一个巨大的挑战。为了维持抗体的供求平衡, 科学家们发明了更好的方法来优化抗体的表达, 以达到增加抗体的单体积表达量并减少生产成本。由于新的克隆方法、基因改造技术以及一系列的细胞和载体工程技术, 加上发酵技术上的改进, 这些都使抗体表达得益较大。

  哺乳动物细胞是抗体药物产品使用的主要表达系统, 主要包括Sp2/0骨髓瘤细胞、 NS0小鼠骨髓瘤细胞、 HEK293人胚胎肾细胞和CHO中国仓鼠细胞, 其中以CHO系应用较广泛。

| 基于CHO细胞的抗体表达系统简介

CHO细胞谱系 

CHO细胞谱系

细胞株开发常用的CHO细胞:DG44, DUXB11, CHO-S, CHO-K1 WT, CHO-K1 GS-/-


筛选标记

筛选试剂

代谢型筛选标记
(扩增型基因筛选标记)

二氢叶酸还原酶(DHFR)

甲氨蝶呤 (MTX)

谷氨酰胺合成酶(GS)

氨基亚砜蛋氨酸 (MSX)

抗生素筛选标记
(非扩增型基因筛选标记)

嘌呤霉素搞性(Puromycin acetyltransferase)

嘌呤霉素 (Puromycin)

杀稻瘟脱氢酶(Blasticidin deaminase)

杀稻瘟霉素 (Blasticidin)

组氨醇脱氢酶(Histidinol dehydrogenase)

组氨醇 (Histidinol)

潮霉素磷酸转移酶(Hygromycin phosphotransferase)

潮霉素 (Hygromycin)

氯林可霉素而药基因(Zeocin resistance gene)

氯林可霉素 (Zeocin)

博来霉素耐药基因(Bleomycin resistance gene)

博来霉素 (Bleomycin)

氨基糖苷磷酸转移酶(Aminoglycoside phosphotransferase)

新霉素 (Neomycin or G418)


CHO细胞的优点

1. CHO细胞遗传背景清晰, 不易传播人类病毒, 具有很高的安全性, 以CHO作为宿主细胞表达生物蛋白质, 容易被药物审核机构, 如FDA审批通过 
2. CHO细胞可以通过悬浮驯化 适应无血清悬浮培养, 并能够实现在无血清培养基中快速及高密度生长,这为药物的质量控制和大规模生产带来极大的便利和实惠; 
3. CHO细胞表达的重组蛋白质能够获得 类似于人源蛋白质的翻译后修饰, 如翻译后的糖基化修饰、 唾液酸化修饰等, 生产的蛋白质较其它表达系统更加与人体天然的生物蛋白质相似第四, 较少分泌内源性蛋白, 降低纯化难度;
4. CHO细胞已经开发出了多种商业化高效高表达系统, 如二氢叶酸还原酶筛选体系、 谷氨酰胺合成酶筛选体系和遗传霉素筛选体系等。 

 

CHO细胞的异质性特征

CHO细胞在长期传代过程中存在的稳定性表达问题, 主要体现在:
1. CHO 细胞遗传不稳定性引起的表达不稳定
CHO 细胞系基因组本身具有不稳定性。通常, 中国仓鼠体细胞的染色体为 11 对22 条, 而中国仓鼠卵巢细胞的染色体则发生了大面积不稳定重排重组现象, 不同细胞系染色体的数目也不恒定。基因组的不稳定性, 主要表现在其染色体层面上的拷贝数变异。

2. 外源基因随机整合引起的表达不稳定
传统方法主要是通过表达质粒转染后, 利用压力筛选从而获得目的蛋白质表达细胞株。因此, 外源基因都是通过随机整合方式, 整合到CHO 基因组内。由于整合位点的不确定性, 可能在细胞培养后期引起表达不稳定。


CHO细胞染色体

  中国仓鼠卵巢细胞拥有22 条染色体, 其中10 对常染色体及2 条性染色体。而CHO-K1 细胞系则显示出与其有极大的不同,其仅有8 条染色体显示出同普通中国仓鼠染色体相同, 而13个染色体则以“Z” 标志, 因其中包含着染色体重排、 缺失、移位等现象。


| 抗体表达CHO细胞株的构建策略与流程 


1. 细胞内的蛋白表达过程

转录 → mRNA加工 → 翻译 → 翻译后折叠与修饰 → 细胞内转运 → 分泌

蛋白表达




















2. 抗体表达CHO细胞株的构建策略

CHO细胞株构建

Representation of different steps involved in building an efficient system for protein expression

 

3. 重组蛋白表达工程细胞株的构建流程图

载体构建 →  转染 → 细胞池(pool) 筛选 → 单克隆化筛选 → 批次补料培养筛选 → 蛋白质量筛选 → 细胞株最终选定与建库 → 细胞培养工艺开发与生产

细胞增殖效果


我们还能为您提供:

基因敲除细胞系服务

基因点突变细胞系服务

基因定点敲入细胞系服务

基因敲除Cell Pool服务



公司简介

苏州阿尔法生物实验器材有限公司

18年专注生物实验室仪器设备与耗材供应,一级授权代理国内外16大品牌。

苏州阿尔法生物实验器材有限公司成立于2008年,18年专注生物实验室仪器设备和耗材供应,服务1000+客户,覆盖科研院所、医院、疾控中心及制药与食品检测企业。

主营生物安全柜、超净工作台、振荡培养箱、移液器、PCR仪、凝胶成像、超低温冰箱、液氮罐、高压均质机等仪器设备及耗材试剂,提供选型、配送、安装、维保全流程服务。

18年专注1000+客户16大品牌一级授权一站式采购

免费服务电话

18934597460
18020269905

全国免费服务热线 · 产品咨询 · 选型建议 · 技术支持

订购热线

0512-62956104
  • 邮箱:haiyan_shao@bioalpha.cn
  • 地址:苏州工业园区星湖街218号生物纳米园A5楼301室
代理品牌

国内外16大品牌 · 一级授权代理

点击品牌查看官网对应产品信息。

海尔生物医疗冷藏箱·超低温冰箱·液氮罐·生物安全柜品牌页 ↗
梅特勒托利多-瑞宁手动/电动移液器·助吸器品牌页 ↗
上海知楚振荡培养箱·摇床·生物安全柜品牌页 ↗
杭州朗基梯度PCR仪·荧光定量PCR仪品牌页 ↗
上海天能电泳仪·凝胶成像系统品牌页 ↗
杭州奥盛核酸提取仪·分光光度计·酶标仪品牌页 ↗
ATS Engineering高压均质机·微射流均质机品牌页 ↗
马尔文帕纳科激光粒度仪·纳米粒度电位仪品牌页 ↗
Gator / SOLENTIM分子互作·单细胞铺板品牌页 ↗
耐思NEST离心管·摇瓶·培养板/瓶品牌页 ↗
海星生物血清·培养基·细胞株品牌页 ↗
百时美生物逆转录酶·内切酶·聚合酶品牌页 ↗
天根DNA/RNA提取核酸试剂品牌页 ↗
碧云天生物生命科学试剂·检测试剂盒品牌页 ↗
哈爵雅生物GMP药厂消毒剂品牌页 ↗
德国EKF葡萄糖乳酸·血红蛋白分析仪品牌页 ↗
官方授权原厂直发正品保障选型支持实验室仪器设备与耗材一站式供应
代理哪些品牌?
一级授权代理海尔、梅特勒托利多-瑞宁、知楚、朗基、天能、奥盛、ATS、马尔文、耐思、天根、碧云天等16大品牌。
如何订购?
订购热线 0512-62956104;咨询可拨打 18934597460 / 18020269905。

热品推荐 / Hot product

海尔生物医疗

海尔生物医疗

苏州阿尔法生物与海尔生物医疗建立战略合作伙伴关系。海尔生物医疗是海尔集团旗下生命科学领域核心品牌,专注低温冷链存储设备研发制造。产品覆盖-196℃液氮存储至+8℃冷藏全温区,服务全球100+国家和地区的医院血站、疾控中心、科研院所。
梅特勒-瑞宁

梅特勒-托利多 Rainin瑞宁

苏州阿尔法生物自2014年开始与Rainin建立合作,已累计赢得500+企业对Rainin产品的信赖与认可。Rainin是业内移液解决方案的业内知名供应商,提供范围广泛的人体工程学手动移液器、电动移液器、多通道移液器、BioCleanLTS和通用移液器吸头及专业移液器服务。
上海知楚

上海知楚

苏州阿尔法生物自2013年10月开始与上海知楚建立合作,通过7年的不断努力与拓展,阿尔法生物作为苏州唯一代理商,拥有了一套完善的售后服务体系,阿尔法累计赢得200+企业的对知楚系列的信赖和认可。上海知楚仪器有限公司是多年致力于振荡培养箱的研发、生产和服务的公司。产品系列丰富,有二氧化碳摇床,恒温振荡培养箱,全温振荡培养箱,震荡培养箱,摇床等.
朗基

杭州朗基

苏州阿尔法生物与杭州朗基科学仪器有限公司建立长期战略合作。朗基作为国产PCR仪的先驱品牌,以高精度半导体温控技术、稳定的荧光检测系统,服务全国超过500家科研机构与临床诊断实验室。阿尔法生物作为朗基苏州区域核心代理商,提供从售前选型到售后,从仪器设备到试剂耗材供应的一站式服务。

阿尔法生物产品中心

全国服务热线

0512-62956104