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  • J82细胞
J82细胞

细胞名称:人膀胱移行细胞癌(STR鉴定正确)

细胞简称:J82细胞

细胞别名: J-82; J 82; J82COT; J82 COT

货号:TCH-C221规格:1×10⁶cells/T25 培养瓶

J82细胞培养基货号:TCH-G221


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J82细胞

细胞名称:人膀胱移行细胞癌(STR鉴定正确)


细胞简称:J82细胞


细胞别名: J-82; J 82; J82COT; J82 COT

货号:TCH-C221

规格:1×10⁶cells/T25 培养瓶

参考目录价格:15 00元 (干冰运输需另加200元干冰费)  


种属来源:人

组织来源:膀胱

特征:移行细胞癌

细胞形态:上皮细胞样

生长特性:贴壁生长

培养体系: MEM+10%FBS+1%P/S

J82细胞培养基货号:TCH-G221

传代比例:1:3-1:6,每2-3天换液一次

传代周期:48-72 h

培养条件:气相:95%空气+5%CO2,温度:37℃

冻存条件:60%基础培养基+30%FBS+10%DMSO,液氮储存

质量检测:细菌、真菌、支原体检测均为阴性

J82细胞源自一名58岁膀胱移行细胞癌的白人男性。胞内无桥粒,有大量粗面内质网及突出绒毛,表达ras基因。

J-82

J82细胞培养步骤:

使用配套培养基货号:TCH-G221

传代比例:1:3-1:6,每2-3天换液一次

传代周期:48-72 h

J82细胞传代培养方法

1.尽量吸干净T25瓶原培养基;

2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞 10-20s,吸走润洗的PBS;

3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;

4.将培养瓶放入37度培养箱消化;

5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;

6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;

7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;

8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;

注意事项 :不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间

消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

J82细胞冻存操作步骤:

冻存液:可有使用海星生物的一步冻存液,使用一步冻存法进行细胞冻存。(不需要程序降温盒)

冻存规格 200-300万/ml,1ml每管

如果采用程序冻存法的可以参考以下步骤:

1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;

2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;

3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4 度静置5-10min,再-20度静置2h后转入 -80度过夜,第二天转入液氮保存

J82细胞培养注意事项

1.冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

2.由于J82细胞贴壁较弱,消化时间偏短,注意控制消化时间;

3.注意控制细胞密度,过高或者过低都可能影响细胞状态,不要长时间高密度培养;

4.细胞生长较快,注意及时换液及传代;


参考文献:

O'Toole CHuman bladder cancer lines: HLA Class I and Class II antigen expression and susceptibility to cytostatic and cytotoxic effects in vitroIn: O'Toole CIn vitro models for cancer researchvol. IVBoca Raton, FLCRC Presspp. 103-125.


O'Toole C, et al. Ultrastructure, karyology and immunology of a cell line originated from a human transitional-cell carcinoma. Br. J. Cancer 38: 64-76, 1978. PubMed: 687519


Fogh J. Cultivation, characterization, and identification of human tumor cells with emphasis on kidney, testis, and bladder tumors. Natl. Cancer Inst. Monogr. 49: 5-9, 1978. PubMed: 571047


Bellet D, et al. Malignant transformation of nontrophoblastic cells is associated with the expression of chorionic gonadotropin beta genes normally transcribed in trophoblastic cells. Cancer Res. 57: 516-523, 1997. PubMed: 9012484


Bender CM, et al. Inhibition of DNA methylation by 5-Aza-2'-deoxycytidine suppresses the growth of human tumor cell lines. Cancer Res. 58: 95-101, 1998. PubMed: 9426064


The cells form poorly differentiated squamous cell carcinomas.




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