J82细胞

细胞名称：人膀胱移行细胞癌（STR鉴定正确）

细胞简称：J82细胞

细胞别名： J-82; J 82; J82COT; J82 COT

货号：TCH-C221

规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶

参考目录价格：15 00元 (干冰运输需另加200元干冰费)  

种属来源：人

组织来源：膀胱

特征：移行细胞癌

细胞形态：上皮细胞样

生长特性：贴壁生长

培养体系： MEM+10%FBS+1%P/S

J82细胞培养基货号：TCH-G221

传代比例：1:3-1:6，每2-3天换液一次

传代周期：48-72 h

培养条件：气相：95%空气+5%CO2，温度：37℃

冻存条件：60%基础培养基+30%FBS+10%DMSO，液氮储存

质量检测：细菌、真菌、支原体检测均为阴性

J82细胞源自一名58岁膀胱移行细胞癌的白人男性。胞内无桥粒，有大量粗面内质网及突出绒毛，表达ras基因。

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J82细胞培养步骤：

使用配套培养基货号：TCH-G221

传代比例：1:3-1:6，每2-3天换液一次

传代周期：48-72 h

J82细胞传代培养方法：

1.尽量吸干净T25瓶原培养基；

2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞 10-20s，吸走润洗的PBS；

3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；

4.将培养瓶放入37度培养箱消化；

5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；

6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清；

7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；

8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养；

注意事项 ：不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间

消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

J82细胞冻存操作步骤：

冻存液：可有使用海星生物的一步冻存液，使用一步冻存法进行细胞冻存。（不需要程序降温盒）

冻存规格 200-300万/ml，1ml每管

如果采用程序冻存法的可以参考以下步骤：

1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞；

2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管；

3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4 度静置5-10min，再-20度静置2h后转入 -80度过夜，第二天转入液氮保存

J82细胞培养注意事项：

1.冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案

2.由于J82细胞贴壁较弱，消化时间偏短，注意控制消化时间；

3.注意控制细胞密度，过高或者过低都可能影响细胞状态，不要长时间高密度培养；

4.细胞生长较快，注意及时换液及传代；

参考文献：

O'Toole CHuman bladder cancer lines: HLA Class I and Class II antigen expression and susceptibility to cytostatic and cytotoxic effects in vitroIn: O'Toole CIn vitro models for cancer researchvol. IVBoca Raton, FLCRC Presspp. 103-125.

O'Toole C, et al. Ultrastructure, karyology and immunology of a cell line originated from a human transitional-cell carcinoma. Br. J. Cancer 38: 64-76, 1978. PubMed: 687519

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Bellet D, et al. Malignant transformation of nontrophoblastic cells is associated with the expression of chorionic gonadotropin beta genes normally transcribed in trophoblastic cells. Cancer Res. 57: 516-523, 1997. PubMed: 9012484

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The cells form poorly differentiated squamous cell carcinomas.