h460细胞株
细胞名称:人大细胞肺癌细胞(STR鉴定正确)
细胞别称:NCI-H460细胞;NCI.H460; H460; H-460; NCIH460; NCI-HUT-460; NCI-460
细胞简称:h460细胞株
产品货号:TCH-C286
种属来源:人
组织来源:肺
特征:肺癌
细胞形态:上皮细胞样
生长特性:贴壁生长
培养体系:RPMI-1640 +10% FBS+1% P/S
h460细胞株培养基货号:TCH-G286
传代比例:1:3-1:6,每2-3天换液一次
传代周期:24-48 h
培养条件:气相:95%空气+5%CO 2,温度:37℃
冻存条件:60%基础培养基+30%FBS+10%DMSO,液氮储存
质量检测:细菌、真菌、支原体检测均为阴性
NCI-H460细胞是从一位大细胞肺癌者的胸水中建立的。h460细胞株表达的p53 mRNA易于检测,其水平与正常肺细胞相当,未表现出NCI-H460细胞DNA总体结构异常。NCI-H460细胞角蛋白和波形蛋白纤维染色阳性;神经丝三联体蛋白阴性。
细胞培养操作说明
细胞的复苏:
1. 从液氮中取出细胞冻存管,快速将其置入37℃水浴中解冻直至冻存管中无结晶,75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2. 将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的15ml 离心管中,1000rpm离心 5min;
3. 弃上清,沉淀用 6ml 完全培养基重悬,接种25cm2 培养瓶,于37℃,5%CO2 细胞培养箱中培养;
传代:
(1)贴壁细胞:
1. 细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃25cm2 培养瓶中的培养液,用PBS 清洗细胞一次;
2. 添加 0.25%胰蛋白酶消化液约
1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm 离心5min;
3. 弃上清,沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬,按1:2 比例进行分瓶传代,补加培养基后放入 37℃,5%CO2 细胞培养箱中培养;
(2)悬浮细胞: 待细胞达到 1x10^6/ml 左右可按照以下方法换液培养或传代。
方法①:收集细胞,1000rpm 离心 5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按
1:2 到 1:3 的比例分到含培养基的新瓶中。
方法②:竖立放置培养瓶,细胞沉淀后弃去上半量培养基,将细胞悬液按1:2 到 1:3 的比例分到含培养基的新瓶中。冻存: 1. 离心收集细胞并进行计数(参考离心条件:1000rpm,5 min)。彻底移去离心管中的上清液; 3. 加入适量的无血清细胞冻存液于离心管中,调整细胞浓度至 1~5×10 6 cells/mL。轻柔混匀,制成细胞冻存悬液;
4. 将离心管中的细胞冻存悬液分装于已标示完全的冻存管中;
5.
直接将含细胞悬液的冻存管放入-80℃冰箱,长期冷冻保存或转入液氮气相中存储。可以使用一步法冻存液。
公司简介
苏州阿尔法生物实验器材有限公司
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苏州阿尔法生物实验器材有限公司成立于2008年,18年专注生物实验室仪器设备和耗材供应,服务1000+客户,覆盖科研院所、医院、疾控中心及制药与食品检测企业。
主营生物安全柜、超净工作台、振荡培养箱、移液器、PCR仪、凝胶成像、超低温冰箱、液氮罐、高压均质机等仪器设备及耗材试剂,提供选型、配送、安装、维保全流程服务。
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