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  • h460细胞株购买
h460细胞株

细胞名称:人大细胞肺癌细胞(STR鉴定正确)

细胞别称:NCI-H460细胞;NCI.H460; H460; H-460; NCIH460; NCI-HUT-460; NCI-460

h460细胞株购买;

h460细胞株培养基货号:TCH-G286


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h460细胞株

细胞名称:人大细胞肺癌细胞(STR鉴定正确)

细胞别称NCI-H460细胞;NCI.H460; H460; H-460; NCIH460; NCI-HUT-460; NCI-460

细胞简称:h460细胞株

产品货号:TCH-C286

种属来源:人

组织来源:肺

特征:肺癌

细胞形态:上皮细胞样

生长特性:贴壁生长

培养体系:RPMI-1640 +10% FBS+1% P/S

h460细胞株培养基货号:TCH-G286

传代比例:1:3-1:6,每2-3天换液一次

传代周期:24-48 h

培养条件:气相:95%空气+5%CO 2,温度:37℃

冻存条件:60%基础培养基+30%FBS+10%DMSO,液氮储存

质量检测:细菌、真菌、支原体检测均为阴性

NCI-H460细胞

  NCI-H460细胞是从一位大细胞肺癌者的胸水中建立的。h460细胞株表达的p53 mRNA易于检测,其水平与正常肺细胞相当,未表现出NCI-H460细胞DNA总体结构异常。NCI-H460细胞角蛋白和波形蛋白纤维染色阳性;神经丝三联体蛋白阴性。


细胞培养操作说明

细胞的复苏:

 1. 从液氮中取出细胞冻存管,快速将其置入37℃水浴中解冻直至冻存管中无结晶,75%的酒精擦拭冻存管外壁;

 2. 将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的15ml 离心管中,1000rpm离心 5min;

 3. 弃上清,沉淀用 6ml 完全培养基重悬,接种25cm2 培养瓶,于37℃,5%CO2 细胞培养箱中培养; 

传代: 

(1)贴壁细胞:

 1. 细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃25cm2 培养瓶中的培养液,用PBS 清洗细胞一次;

 2. 添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm 离心5min;

3. 弃上清,沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬,按1:2 比例进行分瓶传代,补加培养基后放入 37℃,5%CO2 细胞培养箱中培养;

(2)悬浮细胞: 待细胞达到 1x10^6/ml 左右可按照以下方法换液培养或传代。

方法①:收集细胞,1000rpm 离心 5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按 1:2 到 1:3 的比例分到含培养基的新瓶中。

方法②:竖立放置培养瓶,细胞沉淀后弃去上半量培养基,将细胞悬液按1:2 到 1:3 的比例分到含培养基的新瓶中。冻存: 1. 离心收集细胞并进行计数(参考离心条件:1000rpm,5 min)。彻底移去离心管中的上清液; 3. 加入适量的无血清细胞冻存液于离心管中,调整细胞浓度至 1~5×10 6 cells/mL。轻柔混匀,制成细胞冻存悬液;

4. 将离心管中的细胞冻存悬液分装于已标示完全的冻存管中;

5. 直接将含细胞悬液的冻存管放入-80℃冰箱,长期冷冻保存或转入液氮气相中存储。可以使用一步法冻存液。

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