Cas9基因编辑-
基因定点敲入技术服务
超过百个成功敲入KI案例,苏州阿尔法生物携手海星生物一站式解决细胞基因功能研究纯合/杂合敲入细胞系。
Cas9-Cell line Knock-In service(Cas9-CKI)基因定点敲入细胞系是Cas9X技术团队针对实验室常用的各种细胞系,研究并确立针对不同的细胞的外源基因或者片段高效敲入(Knock-in,
KI)的技术操作规程,主要目的就是:解决KI效率低下和KI片段长度限制的问题。
目前使用Cas9的进行基因KI研究方法,主要应用在目的基因后面加上标签,对目的蛋白进行定位;再有就是通过对小鼠细胞的目的基因进行修饰替换成为人的基因,用于动物的CDX模型等。KI实现的方案包括:使用合成的Oligo或者ssDNA(single-stranded DNA,ssDNA)作为“Donor”来实现长片段的敲入;也可以通过AAV病毒的方式(其病毒以ssDNA的方式存在于细胞核中)导入ssDNA作为“Donor”载体,也可以通过dsDNA片段或者环状质粒作为“Donor”来实现KI的目的。
但是不同的细胞模型KI的效率依然不能令人满意,且不同的细胞系之间的效率差异很大,很多细胞无法实现定点的KI。 Cas9X针对不同的片段的长度和不同的细胞特性使用不同的KI策略:小的片段使用Oligo进行KI,再长一点的使用ssDNA进行KI,如果长度超过1Kb的将使用重组的办法进行KI。针对细胞系的KI效率非常低的,需要先构建Cas9稳转细胞株再进行gRNA和Donor的转染来提高KI效率。Cas9X努力优化实验条件满足不同细胞系和不同片段长度的KI服务需求。
Cas9基因编辑- 基因
定点敲入 技术服务 为你的细胞探索优化的KI实验方案。
我们还能为您提供:
-
基因敲除细胞系服务
-
基因点突变细胞系服务
-
基因定点敲入细胞系服务
-
微生物基因编辑服务
-
基因敲除Cell Pool服务
案例分析
基因敲入项目名称
构建eGFP基因敲入的人胶质瘤细胞细胞
实验设计
种属:Human; 基因名称:PRNP
gRNA位点:ATCTTCCTGATAGTGGGATGAGG
Donor载体:5'arm-eGFP-3'arm
细胞信息
种属:Human; 细胞名称:人胶质瘤细胞U251
培养基:DMEM,10%FBS
细胞检测
无菌检测:合格; 支原体检测:合格
细胞克隆形成率检测:细胞增殖能力较好,克隆形成率较好。
细胞基因型检测:针对gRNA打靶位置及其附近基因组序列进行测序。测序结果与理论序列一致。
细胞转导
电转参数:1005V,35ms,2次; 电转体系:10 uL
PCR 筛选
筛选克隆数量:160; 阳性数量:10
公司简介
苏州阿尔法生物实验器材有限公司
18年专注生物实验室仪器设备与耗材供应,一级授权代理国内外16大品牌。
苏州阿尔法生物实验器材有限公司成立于2008年,18年专注生物实验室仪器设备和耗材供应,服务1000+客户,覆盖科研院所、医院、疾控中心及制药与食品检测企业。
主营生物安全柜、超净工作台、振荡培养箱、移液器、PCR仪、凝胶成像、超低温冰箱、液氮罐、高压均质机等仪器设备及耗材试剂,提供选型、配送、安装、维保全流程服务。
18年专注1000+客户16大品牌一级授权一站式采购
代理品牌
国内外16大品牌 · 一级授权代理
点击品牌查看官网对应产品信息。
海尔生物医疗冷藏箱·超低温冰箱·液氮罐·生物安全柜品牌页 ↗
梅特勒托利多-瑞宁手动/电动移液器·助吸器品牌页 ↗
ATS Engineering高压均质机·微射流均质机品牌页 ↗
Gator / SOLENTIM分子互作·单细胞铺板品牌页 ↗
官方授权原厂直发正品保障选型支持实验室仪器设备与耗材一站式供应
代理哪些品牌?
一级授权代理海尔、梅特勒托利多-瑞宁、知楚、朗基、天能、奥盛、ATS、马尔文、耐思、天根、碧云天等16大品牌。
如何订购?
订购热线 0512-62956104;咨询可拨打 18934597460 / 18020269905。