碧云天BCA蛋白定量试剂盒P0009(增强型)(Enhanced BCA Protein Assay Kit)是根据常用的两种蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而成，实现了蛋白浓度测定的简单、高稳定性、高灵敏度和兼容性。

BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween 20、60、80。但本试剂盒受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响，需确保EDTA低于10mM，无EGTA，二硫苏糖醇(DTT)低于1mM，β-巯基乙醇(β-Mercaptoethanol)低于0.01%。不适用BCA法时建议试用碧云天生产的Bradford蛋白浓度测定试剂盒(P0006)。

图1. BCA蛋白定量试剂盒蛋白标准曲线的效果图。左上图为加入BCA工作液后37℃分别孵育30、60和120分钟后的吸光度实测效果图，右图为37℃孵育60分钟时的实拍显色效果图。图中数据仅供参考，实际的检测效果可能会略有不同。

BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型)对样品中各种物质的详细的兼容性和普通的BCA蛋白浓度测定试剂盒相同，每个试剂盒可以检测5000个样品。

室温保存。蛋白标准配制成溶液后-20℃冻存。
注意事项：
需酶标仪一台，测定波长为540-595nm之间，562nm最佳。需96孔板。如果没有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测定，但测定时，需根据比色皿的最小检测体积，适当加大BCA工作液的用量使不小于最小检测体积，样品和标准品的用量可相应按比例放大也可不变。使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。
如发现样品稀释液或裂解液本身就有较高背景，请试用碧云天生产的 Bradford蛋白浓度测定试剂盒(P0006)。
为了加快BCA法测定蛋白浓度的速度可以适当用微波炉加热，但是切勿过热。
EDTA浓度必须小于10mM，不兼容EGTA。不适用BCA法时，请试用碧云天生产的 Bradford蛋白浓度测定试剂盒(P0006)。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

碧云天BCA蛋白定量试剂盒P0009使用说明：
1.蛋白标准品的准备
a.取1.2ml蛋白标准配制液加入到一管蛋白标准(30mg BSA)中，充分溶解后配制成25mg/ml的蛋白标准溶液。配制后可立即使用，也可以-20℃长期保存。
b.取适量25mg/ml蛋白标准，稀释至终浓度为0.5mg/ml。例如取20μl 25mg/ml蛋白标准，加入980μl稀释液即可配制成0.5mg/ml蛋白标准。蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见，也可以用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。稀释后的0.5mg/ml蛋白标准可以-20℃长期保存。
2.BCA工作液的配制
根据样品数量，按50体积BCA试剂A加1体积BCA试剂B(50:1)配制适量BCA工作液，充分混匀。例如5mlBCA试剂A加100μl BCA试剂B，混匀，配制成5.1ml BCA工作液。BCA工作液室温24小时内稳定。
3.蛋白浓度检测
a.将标准品按0、1、2、4、8、12、16、20μl加到96孔板的标准品孔中，加标准品稀释液补足到20μl，相当于标准品浓度分别为0、0.025、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/ml。
b.加适当体积样品到96孔板的样品孔中。如果样品不足20μl，加标准品稀释液补足到20μl。请注意记录样品体积。
c.各孔加入200μl BCA工作液，37℃放置20-30分钟。
注: 也可以室温放置2小时，或60℃放置30分钟。BCA法测定蛋白浓度时，颜色会随着时间的延长不断加深。并且显色反应会因温度升高而加快。如果浓度较低，适合在较高温度孵育，或适当延长孵育时间。
d.用酶标仪测定A562，或540-595nm之间的波长的吸光度。
e.根据标准曲线和使用的样品体积计算出样品的蛋白浓度。

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产品编号	产品名称	产品包装	目录价
P0009	BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型)	5000次	1726.00元
P0010	BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型)	500次	375.00元
P0010S	BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型)	200次	196.00元

产品编号	产品名称	包装
P0009-1	BCA试剂 A	500ml×2
P0009-2	BCA试剂 B	30ml
P0009-3	蛋白标准(BSA)	30mg×2
P0009-4	蛋白标准配制液	5ml
—	说明书	1份

产品编号	产品名称	包装
P0006	Bradford蛋白浓度测定试剂盒	1000次
P0006C	Braford蛋白浓度测定试剂盒(去垢剂兼容型)	800次
P0007	蛋白标准(5mg/ml BSA)	1ml
P0009	BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型)	5000次
P0010	BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型)	500次
P0010S	BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型)	200次
P0011	BCA蛋白浓度测定试剂盒	5000次
P0012	BCA蛋白浓度测定试剂盒	500次
P0012S	BCA蛋白浓度测定试剂盒	200次

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