博奥龙-腹水专用佐剂-免疫佐剂

   货号                       规格

 KX0210048-10        10mL 

 KX0210048-500      500mL .

佐剂（单抗腹水制备用） 贮存：4℃，避光（有效期3年） 

博奥龙-腹水专用佐剂-免疫佐剂是一种预先注入机体内，能增强机体对抗原的免疫应答能力或改变免疫应 答类型的辅助物质。主要用于在单克隆抗体腹水制备中，在小鼠腹腔内接种杂交瘤细胞前， 注射本佐剂到腹腔内，可以诱导杂交瘤细胞在腹腔内快速增殖，并产生和分泌更多的抗体。 使用该佐剂小鼠腹水会比普通佐剂晚出 1.5 天-2 天，但通常情况下腹水的量是普通佐剂出量 的 1.5-2 倍，且单抗腹水效价不变。 

 1 致敏：将佐剂提前取出恢复至室温，建议每组细胞准备 2-3 只 8-10 周龄雌性 Balb/c 小 鼠，每只小鼠腹腔注射 0.3~0.5mL 腹水专用佐剂。

 2 诱导：致敏 15 天（一般 12-18 天）后，将筛选出来的杂交瘤细胞株进行扩大培养后接 种到 Balb/c 小鼠腹腔内： 

2.1 推荐收集对数生长期细胞，1000rpm 5min 离心，1×PBS 反复洗涤 2-3 次，弃掉上 清液； 

2.2 用无菌的 1×PBS 缓冲液或生理盐水，将单克隆的杂交瘤细胞重悬； 2.3 将细胞数调至约 0.8~1×10 6个每只，0.5mL/只腹腔注射小鼠左侧或右侧的下腹部， 避开肝脏和较低中腹部膀胱，沿腿的角度穿透腹膜，1mL 注射器针头进入 1/3 左 右，有刺空感。 

3 腹水收集：注射细胞 7 天左右小鼠腹部会开始肿胀，此时每日都应进行观察，以防小鼠 突然死亡。

当小鼠出现腹部明显膨大、进食困难、行走不便、毛色暗沉时将小鼠处死， 进行一次性腹水的提取：

 3.1 小鼠脱颈椎处死，于 75%酒精浸泡消毒 5min；

 3.2 用镊子提起小鼠腹部外皮，用手术剪将小鼠腹部剪开一个小口，剥离周围皮肤露出 腹腔，随后用 5mL 注射器吸出腹腔内全部腹水，或将腹腔剪开一个小口，将胶 头滴管伸入腹腔内将积液吸取至干净的 15mL 离心管内。

 3.3 3000rpm，10min 离心，无色透明的中间层即为腹水，勿吸取上层中的油状物及离 心管底部的血细胞。

 4 储存：离心后可以将腹水转移至新的离心管内-20℃冻存，也可与灭菌甘油等比混匀后 放于-20℃冰箱长期保存，若存储时间较长，也可转移至-80℃冰箱。

同一株细胞诱导收 集的不同小鼠腹水可以合并储存。