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肿瘤动物模型是研究肿瘤发生、生长和新药效果的重要工具。通过建立合适的肿瘤模型,可以深入了解肿瘤的发展过程,评估新药的效果。本文将介绍肿瘤动物模型的建立步骤和应用,并分享实验中的一些经验。
1. 肿瘤细胞的收集与准备:
我们需要获得对数生长的肿瘤细胞。可以购买肿瘤细胞系现货,或采集肿瘤组织进行细胞培养。将收集的肿瘤细胞加入无血清基质中,并进行离心和洗涤,以去除不希望的成分。最后,用血球计数器计算肿瘤细胞数量,并调整细胞密度至合适的浓度。
2. 小鼠的接种与观察:
选择合适的小鼠品系,并在6-8周龄的小鼠中接种肿瘤细胞。每只小鼠腋下接种一定数量的肿瘤细胞。大约2周后,可触及肿瘤小结节的形成。每隔3天使用游标卡尺测量肿瘤的纵横大小,并记录下来。这个步骤需要持续至少一个月,以观察肿瘤的生长情况和变化。
3. 实验组与对照组的设计:
在实验中,需要设计不同的实验组和对照组,以评估不同干预和新药效果。每组动物数一般为5-10只,确保实验结果的可靠性和统计学意义。
4. 取样和处理:
在小鼠肿瘤生长至直径15-20毫米,即小鼠濒临死亡时,可以取血样分离血清并保存,以进行后续的实验分析。同时,可以处死小鼠并取出肿瘤组织进行拍照,以记录肿瘤的形态特征。还可以取部分肿瘤组织作为冰冻组织切片,并进行适当的免疫组织化学染色。另外,也可以取部分肿瘤组织用3%中性甲醛固定,进行常规HE染色。
5. 肿瘤动物模型的应用:
建立好的肿瘤动物模型可以广泛应用于肿瘤研究领域。通过该模型,可以评估新药效果,以确定适宜的方案和剂量。还可以研究肿瘤的生长机制、转移过程以及与宿主的相互作用。另外,肿瘤动物模型也可用于研究肿瘤CAT、肿瘤学等领域。
通过合理的实验设计和严谨的操作,可以建立稳定可靠的肿瘤模型,并应用于不同领域的研究。同时,我们需要不断总结经验,优化实验方案,为肿瘤研究提供更有力的支持。
附小鼠尾静脉注射方法:
在靠近实验台边缘处, 用大培养皿扣住小鼠, 左手抓住小鼠尾巴, 用酒精棉 球擦尾巴, 可见到两侧静脉; 注射前应确认针管内无气泡, 注射时由尾尖开始, 顺向刺入。失败后再逐渐移向根部重刺, 若准确刺入静脉内, 推进时无阻力, 一般可注入 0.1—0.5ml。
该实验经验分享文章详细介绍了肿瘤动物模型的建立步骤和应用,以及一些实验中的经验。希望以上内容对您有所帮助!
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