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在生物医药研发中,无论是抗体药物开发、靶点筛选,还是 AAV 病毒载体优化,科研人员常面临以下挑战:
1. 通量瓶颈:传统方法(如 ELISA、SPR)单次实验仅能处理数十至数百个样本,面对 thousands of 候选抗体或靶点时,筛选周期长达数周甚至数月。
2. 标记干扰:荧光或放射性标记可能改变分子天然构象,导致亲和力 / 动力学数据失真,尤其在复杂样本(如血清、细胞裂解液)中干扰更显著。
3. 复杂基质兼容性差:传统技术难以直接分析含杂质的样本,需额外纯化步骤,增加时间成本与样本损耗。
4. 表位分组效率低:传统方法进行表位分析时,需分步实验,无法实现多抗体并行比对,难以快速锁定高特异性克隆。
苏州阿尔法生物提供的高通量 BLI 分析系统,以三大核心优势直击痛点:
· 32 通道并行检测技术:单次运行可同时分析 32 组独立实验,搭配 96 孔板自动化进样,单次处理 1152 个样本,较传统 SPR 效率提升 10 倍以上。
· 典型应用:抗体表位分组实验
· 传统流程:需多次上机、分步检测,完成 32×32 抗体组合分析需 2-3 天。
· BLI 方案:8 小时内同步完成 32 个抗体与 32 个抗原的交叉互作检测,通过动力学数据(如 KD 值、结合 / 解离速率)快速分组,筛选出具有不同表位的抗体克隆。
· 原理优势:基于生物膜干涉技术,无需对样本(抗体、抗原、血清等)进行标记,直接监测分子结合时的光程变化,数据真实反映天然互作状态。
· 典型场景解决方案
· 痛点:血清中的抗体检测需去除干扰蛋白,否则标记物易与杂质结合导致假阳性。
· BLI 方案:直接将血清样本上机,非标记技术避免杂质干扰,实时动态监测目标抗体与抗原的结合动力学,数据可信度提升 90% 以上。
· 实时动态监测:可同步获取亲和力(KD)、结合速率(kon)、解离速率(koff)等参数,助力抗体优化(如筛选慢解离抗体)或靶点成药性评估。
· 案例:AAV 病毒载体开发
· 需求:评估 AAV 衣壳蛋白与宿主细胞受体的结合强度,优化载体靶向性。
· BLI 应用:将受体蛋白固定于传感器,实时监测不同 AAV 突变体的结合动力学,快速筛选出亲和力更高的载体变体,缩短载体优化周期 50%。
以 “抗体筛选全流程” 为例,看 BLI 如何提升各环节效率:
· 实验步骤:将候选抗原固定于 BLI 传感器,同时孵育 1000 + 杂交瘤细胞培养上清(无需纯化)。
· BLI 优势:32 通道并行检测,2 小时内锁定 200 + 有结合活性的抗体样本,较 ELISA 省去洗板、标记等繁琐步骤。
· 实验步骤:对初筛阳性抗体进行浓度梯度滴定(如 10nM-10μM),监测结合 - 解离曲线。
· 数据价值:获取 KD 值(如 pM 级高亲和力抗体)、koff 值(筛选长效抗体),为下游成药性评估提供关键依据。
· 实验步骤:采用 “抗原竞争法”,将 32 个抗体与同一抗原混合,通过 BLI 检测结合抑制率,绘制表位分布图。
· 效率对比:传统方法需手动分组实验 4-5 天,BLI 系统 8 小时内完成全组合分析,直接输出表位分组聚类图。
Q1:非标记技术在复杂样本中如何避免背景干扰?
· A:BLI 传感器具有高特异性表面修饰(如 NTA、Protein A),仅捕获目标分子(如 His 标签蛋白、IgG 抗体),且实时基线校正算法可自动扣除基质背景,无需额外纯化样本。
Q2:高通量检测是否会牺牲数据精度?
A:32 通道独立控温(±0.1℃)、光信号实时校准,动力学参数(KD)重复性误差<5%,与单通道 SPR 数据高度吻合(R²>0.95)。
Q3:AAV 载体分析中,如何解决病毒颗粒大、结合信号弱的问题?
A:BLI 提供大分子量专用传感器(如长链 NTA),增大病毒颗粒捕获效率,配合高灵敏度光信号检测,可精准监测 pM 级 AAV - 受体互作。
作为 BLI 分子互作仪的专业供应商,苏州阿尔法生物可提供:
· 硬件优势:32 通道高通量机型 + 自动化样本处理系统,适配从小规模验证到大规模筛选的全场景需求。
· 技术服务:免费提供方法开发、实验设计及数据分析培训,助力客户快速落地高通量筛选方案。
· 行业案例:已协助抗体药企、基因治疗公司缩短筛选周期 40%-60%,成功应用于 PD-1 抗体优化、AAV9 载体亲和力提升等项目。
苏州阿尔法生物实验器材有限公司成立于2008年,位于苏州园区生物纳米园(Biobay)A5幢301室。公司管理团队专注于科学仪器行业十四年,拥有专业的技术团队与完善的售后服务体系,目前已为300余家实验室提供优质产品和服务,涵盖各大高校、检测中心、科研机构、制药企业等13个群体。提供的实验室仪器主要包括振荡培养箱,恒温恒湿培养箱、二氧化碳培养箱、生化培养箱、霉菌培养箱、PCR仪,瑞宁移液器,生物反应器,发酵罐,超低温冰箱,液氮罐,高压灭菌器,超纯水机,天平,离心机,离心浓缩仪、研磨机、葡萄糖乳酸分析仪等。厂商企业授权包括知楚仪器、朗基、中科美菱,梅特勒,乐枫,搏旅、NEST、天根、奥盛在内的80个余厂家。
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