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  • 细胞转染试剂
细胞转染试剂-QuickShuttle-Basic

 细胞转染试剂-QuickShuttle-Basic 用途:

 (1)用于大多数哺乳动物贴壁细胞系的瞬时转染和稳定细胞系构建; 

 (2)用于大多数哺乳动物原代细胞和二倍体细胞的瞬时转染。

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 细胞转染试剂-QuickShuttle-Basic

细胞转染试剂-QuickShuttle-Basic


    QuickShuttle 系列转染试剂属于阳离子型转染试剂,具有高的效率、低毒和易于使用等特点,推荐用于常规哺乳动物细胞系的瞬时转染和稳定细胞系构建。
    QuickShuttle 区别于常规转染试剂的两个最主要特点是:
    (1)可在贴壁细胞传代尚未贴壁时立即进行转染(立传立转);
    (2)转染操作可在一分钟内完成。因此,QuickShuttle 适合用于快速大量瞬时转染表达目的蛋白。
    QuickShuttle系列转染试剂选择一览表
     
    产品名称 货号 规格 产品用途
    QuickShuttle-Basic KX0110041 0.8ml 适用于大多数哺乳动物贴壁细胞系,可用于原代细胞和二倍体细胞
    QuickShuttle-Enhanced KX0110042 0.8ml 适用于大多数哺乳动物细胞系,专用于难转细胞系
    QuickShuttle-Superfast KX0110043 0.8ml 细胞消化和转染同时进行,立传立转。可用于悬浮细胞
    QuickShuttle-293 KX0110044 0.8ml 专用于各种293细胞,立传立转
    QuickShuttle-Hela KX0110045 0.8ml 专用于Hela细胞,立传立转
    QuickShuttle-BHK-21 KX0110046 0.8ml 专用于BHK-21细胞,立传立转

    细胞转染试剂-QuickShuttle-Basic使用说明:

     货号:KX0110041 

    含量:0.8 ml 

    用途:(1)用于大多数哺乳动物贴壁细胞系的瞬时转染和稳定细胞系构建; 

    (2)用于大多数哺乳动物原代细胞和二倍体细胞的瞬时转染。

    使用方法:

     1. 转染前 18~24 小时接种细胞到 24 孔细胞板中,每孔 5~10×104细胞,1ml 完全培养基。

    备注:如果筛 选抗药性稳定细胞系,可以考虑简化的实验步骤,即在细胞传代后直接按下述步骤 2~5 进行转染,无 需 18~24 小时的等候时间。

     2. 将 2μg 质粒 DNA 和 3~5μl 转染试剂分别稀释到 50μl 生理盐水中。

    备注:质粒 DNA 和转染试剂的最 适用量需要根据不同培养基来优化,但理论上不超出 1~2µg 和 3~5µl 范围。

     3. 合并上述两溶液并混匀。备注:无需其它转染试剂所需的 10~30 分钟的等候时间。

     4. 将上述复合物直接加入到细胞培养基中,轻摇细胞板或用加样器吸打混匀。

    备注:转染复合物可直接 加入含血清的细胞培养基中进行转染。在极少情况下会出现贴壁细胞脱落现象,可先从待转染细胞孔 中吸取 500µl 培养基与转染复合物预混后再加入细胞中。若在细胞瓶中进行转染,直接加入到无细胞 贴壁的对面或侧面并摇匀即可。 

    5. 将细胞板移至 37ºC/5% CO2 孵箱中进行培养。备注:无需在转染后 4~6 小时补加血清或更换培养 基。

     6. 24~72 小时后根据实验需要进行瞬时表达分析或稳定细胞系加压筛选。

    QuickShuttle转染效果图


      QuickShuttle-Basic 转染试剂使用注意事项:

       1. 质粒 DNA:请用能够去除内毒素的方法制备高质量的质粒 DNA。 

      2. 稀释液:0.85%(W/V)生理盐水,用低内毒素纯水配制,高压消毒或除菌过滤。 

      3. 培养基:经过 DMEM、RPMI-1640 和 M199 等常规培养基测试,推荐使用含 5~10%牛血清的 DMEM,若转染效果不理想可尝试其它培养基。 

      4. 以 24 孔细胞板转染实验为例,推荐每孔低内毒素质粒 DNA 用量为 2µg、转染试剂用量为 3~5µl,请在正式实验前根据不同细胞和不同培养基用报告基因进行优化。 

      5. 如果实验目的在于筛选抗药性稳定细胞系,可在细胞传代后尚未贴壁时直接进行转染,从而可节省 18~24 小时的转染前细胞培养时间。


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