苏州阿尔法生物实验器材有限公司

13年专注生物实验室仪器设备&耗材综合供应

0512-6295610418934597460

实验室耗材 上千款产品 丰富齐全
  • 天根试剂盒
天根试剂-快速质粒小提试剂盒-DP105
天根试剂-快速质粒小提试剂盒-DP105采用硅胶膜吸附技术,结合质粒DNA,操作简单、快速。每次处理1-4 ml 过夜培养的细菌培养液,仅需8 min 即可提取多至24 μg 的质粒DNA。使用本试剂盒提取的质粒DNA 可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接、转化、 文库筛选、体外翻译、转染一些常规的传代细胞等。
全国热线

0512-62956104

天根试剂-快速质粒小提试剂盒-DP105

DP105

产品简介

天根试剂-快速质粒小提试剂盒-DP105采用硅胶膜吸附技术,结合质粒DNA,操作简单、快速。每次处理1-4 ml 过夜培养的细菌培养液,仅需 8 min 即可提取多至24 μg 的质粒DNA。使用本试剂盒提取的质粒DNA 可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接、转化、 文库筛选、体外翻译、转染一些常规的传代细胞等。

产品特点:

■ 快速:步骤少,操作简单,仅需8 min。

■ 高效:可提取菌体85% 以上质粒DNA。

■ 配备了独特的TIANRed 试剂,可以清晰辨明抽提过程中样本的裂

解程度,确保得到高效率、高纯度的质粒DNA。

提取得率

质粒类型

菌液量

得率

质粒

低拷贝

1-4 ml

3-10 μg

pBR322, pACYC及其衍生载体

pSC101及其衍生载体,

SuperCos, pWE15

高拷贝

1-4 ml

6-24 μg

pTZ, pUC, pBS, pGM-T


快速质粒提取试剂盒颜色变化

天根试剂盒官网


天根质粒小提试剂盒

使用注意事项

 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。 

1.溶液P1在使用前先加入RNase A和TIANRed(将试剂盒中提供的RNase A和TIANRed全 部加入),混匀,置于2-8℃保存。 2.使用前请先检查溶液P2和P5是否出现浑浊,如有混浊现象,可在37℃水浴中加热几分钟,即可恢复澄清。 

3.注意不要直接接触溶液P2和P5,使用后应立即盖紧盖子。 

4.所有离心步骤均为使用常规台式离心机室温下进行离心,速度为12,000 rpm (~13,400×g )。

5.提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。

 6. TIANRed的使用方法: TIANRed是一种指示剂,用以指示整个操作的正确性,对人体无 害。使用时按照TIANRed:溶液P1=1:200进行混合,彻底颠倒混匀,混匀后的溶液为澄清 的红色。将混匀后的溶液加入到收集好的菌体中彻底混匀,由于菌体的存在,混匀后的溶液为浑浊的红色;添加溶液P2之后彻底混匀后,溶液的颜色为澄清的紫色,则说明充 分裂解;再添加溶液P5至彻底混匀后,溶液为澄清的黄色,说明中和复性充分。

实验操作步骤说明:

 使用前请先在漂洗液PWT中加入CH2O6,加入体积请参照瓶上的标签。

 1. 取1-4 ml过夜培养的菌液,加入离心管中,使用常规台式离心机,12,000 rpm (~13,400×g )离心1 min,尽量吸除上清(菌液较多时可以通过多次离心将菌体沉淀收集 到一个离心管中)。

 2. 向留有菌体沉淀的离心管中加入150 μl溶液P1(请先检查是否已加入RNase A和 TIANRed),使用移液器或涡旋振荡器彻底悬浮细菌沉淀。 注意:如果有未彻底混匀的菌块,会影响裂解,导致提取量和纯度偏低。 

TIANRed试剂的加入对于后续PCR、酶切和测序都没有影响。使用时按照TIANRed:溶液 P1=1:200进行混合,彻底颠倒混匀,混匀后的溶液为澄清的红色。将混匀后的溶液加入 到收集好的菌体中彻底混匀,由于菌体的存在,混匀后的溶液为浑浊的红色。 

3. 向离心管中加入150 μl溶液P2,温和地上下翻转6-8次使菌体充分裂解。 注意:温和地混合,不要剧烈震荡,以免污染基因组DNA。此时菌液应变得清亮粘稠,如果 未变得清亮,可能由于菌体过多,裂解不彻底,应减少菌体量。 由于使用了TIANRed,添加溶液P2彻底混匀后,溶液的颜色为澄清的紫色。如果在紫色中 混杂有浑浊的红色,则说明裂解不充分,继续混匀直至溶液颜色完全变为澄清的紫色。 

4. 向离心管中加入350 μl溶液P5,立即快速地上下颠倒混匀12-20次,混匀,此时将出 现絮状沉淀。12,000 rpm (~13,400×g ) 离心2 min。

 注意:加入溶液P5后应立即混合,应快速上下颠倒混匀,避免产生局部沉淀。上清中含 有少量微小白色沉淀对后续实验没有任何影响。如果上清中存在大量微小白色沉淀,可 再次离心后取上清。由于使用了TIANRed,添加溶液P5彻底混匀后,溶液为澄清的黄 色,如果在黄色中混有紫色,则说明复性不充分,继续混匀至溶液颜色完全变为澄清的 黄色。 

5. 将上一步收集的上清液用移液器转移到吸附柱CP3中(吸附柱放入收集管中),注意尽量不要吸出沉淀。12,000 rpm (~13,400×g) 离心30 sec,倒掉收集管中的废液,将吸附柱 CP3放入收集管中。

6. 向吸附柱CP3中加入300 μl漂洗液PWT,12,000 rpm (~13,400×g) 离心30 sec,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CP3放入收集管中。 

7. 将吸附柱CP3放入收集管中, 12,000 rpm (~13,400×g) 离心1 min,目的是将吸附柱中残 余的漂洗液去除。

8. 将吸附柱CP3置于一个干净的离心管中,向吸附膜的中间部位滴加50-100 μl洗脱缓冲液 TB,12, 000 rpm (~13,400×g) 离心30 sec将质粒溶液收集到离心管中。 

注意:洗脱缓冲液体积不应少于50 μl,体积过小影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有较大影响。


尊敬的访客:

当您来到这个页面时,您已成为我们最尊贵的客户,苏州阿尔法生物实验器材有限公司真诚欢迎您的到来!

联系我们
免费服务电话:0512-62956104十三年专注于生物实验室仪器供应

热品推荐 / Hot product

楚怡 BioCore-SUB 一次性生物反应器动物细胞培养不锈钢罐

楚怡 BioCore-SUB 一次性生物反应器动物细胞培养不锈钢罐

BioCoreSUB一次性生物反应器控制器,适合从12.5L至2000L工作体积的不同公司的一次性生物反应器袋子,可用于快速工艺开发,并实现商业化生产的无缝放大。可以批次培养、补料培养和灌注培养。控制系统采用上海楚怡自主研发的BioCoresoftware系统,可实现灵活的配置需求,一次性反应袋适配于多个品牌确保用户供应链安全。
楚怡 BioCore QF Pro不锈钢微生物发酵系统

楚怡 BioCore QF Pro不锈钢微生物发酵系统

•模块化设计,节约空间•插针式补料口,使用方便•开放式设计,使用维修方便•多用户保护功能•可设定多级控制和查看权限
楚怡 BioCore QC pro 不锈钢篮式贴壁培养生物反应器

楚怡 BioCore QC pro 不锈钢篮式贴壁培养生物反应器

•传氧效果好,满足高密度细胞培养要求•双温度PID控制,控温稳定,精度高•操作安全、可靠,方便•开放式设计,使用、维修方便•伺服电机扭力大,工作稳定可靠
楚怡 BioCore QC台式细胞生物反应器玻璃

楚怡 BioCore QC台式细胞生物反应器玻璃

•PLC作为控制系统,可靠、稳定•溶氧控制精确•选用高品质部件,确保反应器质量•防腐蚀,易清洁•安装简单方便,插电和通气即可使用

阿尔法产品中心

全国服务热线

0512-62956104