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天根试剂-高保真PCR-pcr反应预混液NG219
天根试剂-高保真PCR-pcr反应预混液NG219 TIANSeq HiFi Amplification Mix 是一种高保真PCR扩增预混液,适用于高通量测序文库的PCR扩增和其他PCR相关的克隆和检测。
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天根试剂-高保真PCR-pcr反应预混液NG219


NG-219

天根试剂-高保真PCR-pcr反应预混液NG219 TIANSeq HiFi Amplification Mix 是一种高保真PCR扩增预混液,适用于高通量测序文库的PCR扩增和其他PCR相关的克隆和检测。

    扩增预混液中的Ultra HiFi DNA Polymerase是通过定向分子进化技术开发得到的新型快速高保真DNA聚合酶,增强了DNA聚合酶对模板的亲和力,使得此酶在扩增速度和延伸能力上得到了提升,增加了PCR成功率和产物量。同时,此酶具有优良的3'- 5'外切酶活性(Proofreading活性),保真性可达市场上主流产品水平,保证了基因和文库扩增过程中的真实性。此外,本产品中的DNA聚合酶具有热启动(Hot Start)功能,可有效的控制低温情况下的非特异扩增和酶活损耗,进而保证了PCR扩增的特异性和稳定性。
   为一管式预混Mix形式,内含热启动型的Ultra HiFi DNA Polymerase、超纯dNTPs、MgCl2、反应缓冲液等PCR反应所需组分,只需加入模板和引物即可进行PCR扩增反应,操作简便。除此之外,预混Mix中还整合了PCR反应增强系统,不但提高了预混Mix的稳定性,使得聚合酶对PCR反应抑制剂的耐受能力增强,还提高了Ultra HiFi DNA Polymerase对不同GC含量模板的适应能力,使得本产品具有广泛的样品普适性和模板投入范围, 具有降低PCR反应的偏好性。
   pcr反应预混液NG219的PCR产物为平末端,可加A处理再与T载体连接或直接使用平末端克隆载体进行基因克隆,如TIANGEN零背景快速连接试剂盒(目录号:VT205)。

产品特点

 扩增快速:延伸速度可达10-15 sec/kb;  延伸力强:可扩增长至15 kb的DNA片段;
 特异性好:具有热启动功能,可用于多重PCR;
 灵敏度高:模板用量可低至10 pg;
 偏好性低:针对不同GC含量的模板都有均衡的扩增效果;
 应用广泛:可用于高通量测序文库的PCR扩增和其他PCR相关的克隆和检测。

适用范围

    用于DNA的高保真快速扩增,如基因表达克隆、基因定点突变、基因组点突变的分析 (SNP)等;更可用于高通量测序中,如高保真基因组DNA文库的富集。 

实验例

实验1

使用分子信标法(Ma et al., Anal Biochem, 2006)检测不同高保真酶的热启动性。所有产品均宣传其具有热启动能力,但检测结果表明这些产品中只有 UltraHiFi在95度时才被激活,其余产品在40-50 度时均有链退火和延伸能力。

实验2


使用 Lac I法检测酶的保真性。TIANGEN UltraHiFi的保真性是普通 Taq酶的50倍以上

实验3

实验4

实验5

 

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