Smartarose是一种球形琼脂糖凝胶过滤基质，Smartarose 4B和Smartarose 6B的琼脂糖含量分别为4%和6%o Smartarose CL凝胶是 Smartarose 4B和Smartarose 6B的衍生物，化学和物理性能更优异，流速更快。Smartarose CL凝胶耐有机溶剂，因此适合在有机溶剂中分离物质。Smartarose和Smartarose CL分离范围较广，适合对分子量不同的样品进行表征或分离。

pH范围是我们根据实验和经验估算的。请注意：pH长期稳定性是指凝胶在长时间内其层析性能不会改变的pH范围。pH短期稳定性是指凝胶再生和清洗时稳定的pH范围。

介质保存于20%乙醇。装柱前建议将20%乙醇抽滤去除，置换成去离子水。

将75%介质和25%去离子水混句，真空负压脱气。不要使用粘性试剂装柱。装柱完成后，可以用粘性缓冲液低流速平衡层析柱。

装柱方法有两步，第二步应在恒压下进行，柱压见表2。凝胶层析的分辨率随柱床高度的增加而增加。因此，柱床高度最好在60 cm以上。

1）用去离子水冲洗层析柱底筛板与接头，确保柱底筛板上无气泡，关闭柱底出口，并在柱底部留出1-2 cm的去离子水。

2）将填料悬浮起来，小心的将浆液连续地倒入层析柱中。用玻璃棒沿着柱壁倒入浆液可减少气泡的产生。

3）如果使用储液器，应立即在层析柱和储液器中加满水，将进样分配器放置于浆液表面，连接至泵上，避免在分配器或进样管中产生气泡。

4）打开层析柱底部出口，开启泵，使其在设定的流速下进行。最初应让缓冲液缓慢流过层析柱，然后缓慢增加至最终流速，这样可避免液压对所形成柱床的冲击，也可以避免柱床形成的不均匀。如果达不到推荐的压力或流速，可以用你所使用泵的最大流速，这样也可以得到一个很好的装填效果。（注意：在随后的色谱程序中，不要超过最大装柱流速的75%）当柱床高度稳定后，在最后的装柱流速下至少再上2 倍柱床体积的去离子水。标上柱床高度。

7）将分配器推向柱子至标记的柱床高度处。允许装柱液进入分配器，锁紧分配器接头。

8）将装填好的层析柱连接至泵或色谱系统中，开始平衡。如果需要可以重新调整分配器。

为了检验层析柱的质量，应进行柱效测试，以确定理论塔板数和峰不对称系数。

如图1所示计算理论塔板数，用如下公式：N/m = 5.54 （VrM）2 x 1000/L

平衡液为蛋白纯化后，用于保护蛋白的溶液，根据客户需求自行选择。

样品在上样前建议离心或用0.22 pm或0.45|jm滤膜过滤，减少杂质，防止堵塞柱子。

上样之前，用平衡液至少平衡两个柱体积，或直到基线稳定。含去垢剂的溶液可能需要平衡更长时间。

推荐上样体积为柱体积的2-5%o可以通过上样管或样品环来上样。纯化流速最高不能超过装柱流速的70%0

再生通常用水冲洗2倍柱体积，然后用缓冲液冲洗2-3倍柱体积，如果不立刻使用，则用20%乙醇平衡后，4-30°C保存。对不同的样品, 建议大约5次循环后，采用完整的在位清洗（CIP）o

CIP是去除以前生产过程中产生的结合过紧密、沉淀或变性的物质。在某些情况下，介质再生后，月謳或变性蛋白跡物质仍可育诫留茁扫=o 需要制鵰料中已知污染I刎楼来设H特定的CIP程序。

•如果反压增高，在介质清洗前检查阀门、管线等中止情况。

用0.5 M NaOH清洗一个柱体积，去离子水或缓冲液平衡至中性，流速40 cm/ho

用4倍柱体积的1.0-2.0 M NaOH溶液，流速40 cm/h对介质进行清洗，然后立即用2-3倍柱体积的水清洗。

用4-10倍柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗（使用有机溶剂要梯度清洗，避免起泡）或者用含去垢剂的酸或中性溶液。比如，用1 M 醋酸溶液含0.5%非离子型去垢剂，清洗流速40 cm/h。随后用70%乙醇冲洗5个柱体积洗去残留去垢剂。

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苏州阿尔法生物实验器材有限公司成立于2008年，18年专注生物实验室仪器设备和耗材供应，服务1000+客户，覆盖科研院所、医院、疾控中心及制药与食品检测企业。

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项目	性能
Smartarose 琼脂糖最佳分离范围粒径推荐线性流速* (cm/h) pH稳定性**	4B 6B CL-4B CL-6B 4% 6% 4% 6% 70x103-20x106 1Qx103 -4x106 70x103-20x106 10x10 3-4x106 45-165 pm 11 cm/h 14 cm/h 26 cm/h 30 cm/h 4-9 4-9 3-13 3-13 耐受凝胶层析常用溶液，如8 M尿素、6 M 盐酸
试剂耐受	耐受凝胶层析常用溶液，如8 M尿素、6M盐酸 Mo也耐受乙醇、DMF、THE、丙酮、DMS、弧。氯仿、二氯甲烷、二氯乙烷、卩比卩定、磷酸三乙酯和乙月青等有机溶剂。
物理性能灭菌	pH或离子强度变化引起的体积变化可以忽略不计化学方法水蒸气高压灭菌，120°C, 20 min

介质	步骤1 流速(cm/h)	步骤2 压力(MPa.bar.Psi)
Smartarose 4B	15	0.018,0.18,2.6
Smartarose 6B	30	0.025,0.25,3.6
Smartarose CL-4B	30	0.025,0.25,3.6
Smartarose CL-6B	30	0.045,0.45,6.4
层析柱的装填(使用储液器装填) 装柱前根据层析柱直径计算柱子底面积，根据所需装柱高度计算所需介质体积，公式如下： V = 1.157ir2h

产品名称	货号	规格
	SEC0060	25 ml
	SEC0061	100 ml
Smartarose 4B	SEC0062	500 ml
	SEC0063	1 L
	SEC0064	10 L
	SEC0070	25 ml
	SEC0071	100 ml
Smartarose 6B	SEC0072	500 ml
	SEC0073	1 L
	SEC0074	10L
	SEC0080	25 ml
	SEC0081	100 ml
Smartarose CL-4B	SEC0082	500 ml
	SEC0083	1 L
	SEC0084	10L
	SEC0090	25 ml
	SEC0091	100 ml
Smartarose CL-6B	SEC0092	500 ml
	SEC0093	1 L
	SEC0094	10 L

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