PANC-1细胞是胰腺癌细胞的一种常用细胞系，用于研究胰腺癌、药物筛选以及其他相关研究。为了保持细胞的生长和状态稳定，定期进行细胞传代培养是必要的。本文将为您介绍PANC-1细胞传代培养的实验步骤，以帮助您高效地进行实验。

肿瘤细胞在组织培养中占据较为重要地位。肿瘤细胞相对容易培养，肿瘤细胞系是目前建立的细胞类型中数量最多的。此外，肿瘤是人类疾病的最大威胁。因此，肿瘤细胞培养已成为了解癌症机制和开发抗癌药物不可或缺的技术。本指南旨在作为肿瘤细胞培养的基本介绍，包括培养基、传代培养、冷冻保存和污染防治。

细胞传代培养步骤，注意事项：一些细胞系可能需要几天时间才能从冷冻保存中完全恢复。比如：一些杂瘤细胞在培养的第一天活力很差，会产生细胞碎片。解冻后，细胞将开始恢复并进入指数增长。

贴壁细胞传代培养是生物学研究中常常遇到的基本实验。细胞培养操作中使用的实验耗材主要包括离心管、培养板、细胞培养瓶、无菌一次性培养皿、细胞培养板、移液器吸头、一次性移液管、乳胶手套等；液体培养基和添加剂、血清等。还包括实验室消毒液、细胞培养基、胰蛋白酶、0.4%台盼蓝、抗生素和适当的细胞培养添加剂、不含钙镁的平衡盐溶液、适用于细胞类型的牛血清等。

 常见的传代培养方法涉及通过使用蛋白水解酶（如胰蛋白酶或胶原酶）破坏细胞间和细胞与基质的连接。在细胞解离成主要由单细胞组成的悬浮液后，将它们稀释并转移到新的培养容器中。在那里它们可以重新附着并开始生长和分裂，经过一段时间的孵化后再次接近汇合。此时，它们可以再次进行传代培养或用于实验。

   我们知道开始培养的细胞不能无限期地生长，因为受限区域内的细胞数量不断增加，营养物质也会被消耗，从而 导致有毒的代谢产物增加，另外根据实验或生产需要，也要对细胞进行 扩大培养。通过去除培养基并将细胞转移到新鲜的生长培养基和基质中，细胞获得了新鲜的营养并去除了有毒代谢物，从而可以长期维持培养。

   传代培养是细胞培养常规保种方法之一，也是几乎所有细胞生物学实验的基础。当细胞在培养瓶中长满后就需要将其稀释，分种成多瓶，细胞才能继续生长。这一过程就叫传代。传代培养可获得大量细胞供实验所需。传代要在严格的无菌条件下进行，每一步都需要认真仔细的无菌操作。本实验以传代大鼠骨髓充间质干细胞为例进行细胞传代的步骤做一介绍。