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传统稳定性研究通常依赖 SEC-HPLC、差示扫描量热(DSC)、圆二色谱(CD)与显微成像等 orthogonal 方法,这些方法各自准确,但样品消耗大、通量低、操作门槛高。在候选分子数量成百上千的早期筛选阶段,研发团队需要一种能在微孔板上快速输出多参数稳定性数据的平台。Zetasizer Core 正是在这一背景下推出的新一代高通量生物物理筛选系统。
静态光散射测量散射强度随角度与浓度的变化,用于获得绝对分子量与第二维里系数 B22。通过测量不同浓度下的散射信号,可以定量判断蛋白分子在特定缓冲液中是倾向自关联(B22 负值)还是相互排斥(B22 正值)。Zetasizer Core 配备专用 SLS 光路,将原本需要专家操作的 B22 测量转化为常规筛选指标。
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参数 |
来源技术 |
含义与判读 |
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dH(流体力学直径) |
DLS |
蛋白在溶液中的表观粒径;单体约 5–10 nm,显著增大提示寡聚或聚集。 |
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PI(多分散指数) |
DLS |
< 0.1 为单分散;> 0.3 提示样品不均一。 |
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kD(扩散相互作用参数) |
DLS 浓度系列 |
正值提示分子间排斥、胶体稳定;负值提示自关联倾向。 |
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B22(第二维里系数) |
SLS 浓度系列 |
正值提示溶剂良、分子间排斥;强负值提示自聚集倾向。 |
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Tm(熔融温度) |
DSF |
50% 蛋白去折叠的温度;越高提示结构越稳定。 |
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Tonset(去折叠起始温度) |
DSF |
蛋白开始去折叠的最低温度,比 Tm 更贴近实际应力条件。 |
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Tagg(聚集起始温度) |
DLS/SLS |
粒径或散射强度上升的温度;与 Tm 对比可判断是先去折叠还是先聚集。 |
配体结合与化学变性筛选:Core DSF 版本支持 EC50(配体结合)与 C50/Cm(化学变性剂浓度)测量,可用于先导化合物筛选与稳定性缓冲液开发。
Zetasizer Core 将 DLS、SLS 与 DSF 三种正交技术整合到标准微孔板工作流,为生物药早期候选分子筛选与制剂开发提供了一套多参数、高通量、低样品消耗的稳定性评估方案。它不替代 DSC、SEC 与 CD 等经典方法,但在早期筛选阶段,能够以传统方法数十分之一的样品与时间成本,输出结构稳定性与胶体稳定性的组合判断,帮助研发团队更快地锁定值得深入开发的分子与处方条件。
苏州阿尔法生物实验器材有限公司成立于2008年,位于苏州园区生物纳米园(Biobay)A5幢301室。公司管理团队专注于科学仪器行业十八年,拥有专业的技术团队与完善的售后服务体系,目前已为300余家实验室提供优质产品和服务,涵盖各大高校、检测中心、科研机构、制药企业等13个群体。提供的实验室仪器主要包括振荡培养箱,恒温恒湿培养箱、二氧化碳培养箱、生化培养箱、霉菌培养箱、PCR仪,瑞宁移液器,生物反应器,发酵罐,超低温冰箱,液氮罐,高压灭菌器,超纯水机,天平,离心机,离心浓缩仪、研磨机、葡萄糖乳酸分析仪等。厂商企业授权包括梅特勒-瑞宁Rainin 、知楚&搏旅、海尔 、杭州朗基、上海天能胶成像仪、恒尔离心机,杭州奥盛、EKF葡萄糖乳酸分析仪、小鳄Gator 、耐思NEST、天根、 海星、哈爵雅消毒液等厂家;进口品牌包括:Thermo、METTLER TOLEDO、Eppendorf、PerkinElmer、Beckman、Merk Millipore、Agilent、BMG、Tecan、Sartorius等。
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