移液器的校准，意味着确定分配体积和选定体积之间的差异。移液器校准是指通过校对调整移液器，使分配的体积在一定的规格范围内。工厂校准期间，可以通过不同的称量在量程的MAX体积和MIN或MAX体积的 10%（以较高者为准）检查性能。当您购买移液器时，您应该选择一款能够针对不同温度和各种粘性液体进行重新校准和调整的移液器。

在质量体系中校准移液器  

质量系统中移液器校准的主要目标是确保以预期的精度进行测量。误差限制通常来自制造商的规格，而执行工作所需的精度要低得多。移液器的校准实质是根据公认标准（DIN 12650 或 ISO 8655）设置限制。根据质量体系中校准移液器的程序如下： 

一、设备要求和测试条件

1.平衡度测定：

天平的刻度值应根据所选的移液器体积来选择。

注意：使用已知砝码定期检查您的天平校准情况。

2.测试液体要求：

蒸馏水或去离子水，“3 级”，符合 ISO 3696。测试水在校准前至少在校准室中放置 2 小时，以达到与测试室条件的平衡。测试室条件要求：

3.测试在 20C 至 25C 的恒定 (+/- 0.5C) 温度下在无气流的房间中进行。建议相对湿度在 45% 以上。尤其是体积在 50 vl 以下的情况下，空气湿度应尽可能高，以减少蒸发损失的影响。

- 测试室内的移液器、水和空气应处于相同温度。

- 新吸头应预先润湿 1 至 3 次以提高准确性。

- 始终从水箱中吸取水，不要从天平中取回水。

- 根据使用频率和应用情况定期检查校准，但至少每年一次。如果每天使用，建议间隔三个月。

二、一般移液器校准程序

1.收到需要校准的移液器后，每个移液器都小心地打开包装并检查是否有任何可见的损坏迹象。发现的任何可见损坏都会立即报告给客户。客户将被告知损坏是否可以修复以及将收取哪些额外费用。客户将发出新的工作订单以支付维修费用。

2.对每个移液器进行辐射污染扫描。发现的任何辐射污染都会立即报告给客户，并且移液器将被拒绝校准。

3.所有客户的移液器都经过计数，并与提供的工作订单上报告的数量进行比较。任何数量差异都会立即报告给客户。客户将有机会找到任何缺失的数量，否则工作订单将需要修改并由客户签署。

4.每个工作订单将被放置在一个单独的内部存储箱中，直到计划进行校准。

为每个工作订单分配单独的工作 ID 号。

6.检查客户信息与存档信息的任何差异，并在需要时进行更正。所有移液器都在分配的作业 ID 号下输入 Cal Lab 数据库，并为每个仪器分配 ID 号。

三、预校准程序

• · 在校准和任何移液器调整之前获得和记录的数据也将被记录下来。
• · 每个移液器都将在制造商指定的MIN和MAX量程点进行测试。每个点进行十次测试。
• · 作为预防性维护的一部分，每个移液器都根据制造商的图表进行拆卸，并用适当的化学溶液彻底清洁。
• · 所有零件都经过仔细检查，活塞在大多数情况下都经过抛光，活塞密封和 O 形圈以及所有有缺陷和故障的零件都已更换。完成后，将根据制造商的图表和程序重新组装每个移液器。再次目视检查移液器的功能是否正常。

四、移液器校准步骤
1.在移液器校准开始时，每个移液器在进行任何调整之前都会预先检查 3 次。如果移液器失败，将执行适当的校准调整。校正后，每台仪器将在最低和最高量程点进行校准，每个测试点进行10 次测试。

2.校准数据将被记录并报告在校准报告中。

3.为每个移液器发布校准报告以及整个工作的校准摘要。适当的技术人员签署报告。

创建校准标签并贴在每个移液器上。所有移液器都经过交叉核对客户提供的文书工作以及实验室内创建的文档。

4.QC 主管检查随机选择的移液器的整体性能。

5.如果检测到任何错误，则将整个 Job 送回以进行重新检查。

6.QC 主管批准工作，移液器经过仔细包装并随附所有校准文档交付给客户。

移液器误差的来源：

l 挥发性液体蒸发。在饱和空气中使用。

l 高密度液体下沉。改变技术。

l 粘性液体会粘在尖端。改变技术。

l 亲水吸头将保留液体。预湿笔尖。

l 浸入式吸头携带液体。浸入 2-3 毫米。

l 有角度的移液器会吸收更多的液体。保持垂直。

l 表面张力会降低精度。改变技术。

l 冷热液体。在室温下吸取液体。

l 人的因素。练习和观察技术。

五、移液器校准计算公式：

质量到体积的转换

V = (w + e) x Z

V = 体积 (vl)

w = 重量（毫克）

e = 蒸发损失 (mg)

Z = mg/vl 转换的转换系数

注意：蒸发损失可能在体积小时明显。要确定质量损失，请将水分配到称量容器中，记下读数并开始用秒表计时。检查读数在 5 秒内下降了多少。将此与移液时间进行比较。通常，移液时间可能为 5 秒，质量损失高达 2 mg。如果在容器上使用蒸发阱或盖子，则无需进行蒸发校正。

换算系数 Z 用于计算在测试温度和压力下悬浮在空气中的水的密度。请参见第 15 页的转换表 1。

准确度（系统误差）

准确度是移液器的分配体积和选定体积之间的差异。

精度在移液器校准证书上以相对值表示：

精密度（随机误差）
精密度是指移液的可重复性。它表示为标准偏差 (s) 或变异系数 (cv)。除了移液器的特性外，实验室实践和用户体验是影响精度的主要因素。 

根据 DIN 12650 的误差（F 值）

DIN 标准没有给出准确度和精密度的单独限制，而是使用组合误差限制：F 值。

F = | 一个 | + 2 xs

计算相对 F 值：

F% = | % | + 2 x 数量

表 2 显示了根据 DIN 12650 标准对单通道空气置换移液器的误差限制。对于多道移液器，这些限制加倍。对于可变容量移液器，标称容量是最大容量。标称体积的绝对 vl 限制适用于整个体积范围内的每个选定体积。

例如，对于 20-200UL的移液枪，每个选定体积的误差限制为2.0ul。如果移液器的标称体积介于表中的数值之间，则使用最接近体积的相对误差限值 F%。如果标称体积正好在表 2 中的两个体积之间，则使用较低体积的相对误差限值 F%。

移液器精密度和准确度的评估

无差错移液需要精密度和准确度。许多因素会影响这些规格，它们是评估移液器性能的主要定量参数。

例如当设置体积为 20 vl 时：准确但不精确：平均体积是正确（设定）体积，但单独移液与设定体积不同。

精确，但不准确：单独移液之间没有变化，但平均体积与设定体积不同。

准确和精确：平均体积是设定的体积，不同移液之间没有差异。

1. 移液器垂直，吸头浸入液体约 1 cm。

2. 移液器垂直，吸头浸入液体约 3 cm。

3. 30×40度角移液器；尖端浸入液体中约 3-4 厘米。

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