移液器校准的小常识

移液器校准同样是保证移液工具准确度及实验准确率的关键，下面就移液器校准相关问题进行解答，希望能对您的实验有所帮助。

一、移液器校准的重要性

在实验室中需要高精度的实验中，移液器用于精确测量和转移少量液体。

然而，移液器测量中的误差来源可能来自设备故障或操作员的误操作。分配体积的任何差异都可能影响 qPCR 结果等实验的结果和重现性。

因此，有必要每隔几个月检查一次移液器校准，以通过分配正确的体积来确保准确性。这就是为什么移液器校准被认为是良好实验室规范 (GLP) 的基本部分的原因。

在上一篇文章中，我们讨论了保持移液器准确度的技巧——今天我们将学习如何进行移液器校准。

二、移液器校准原理

在 20 ° C 的温度和一个大气压下，水的密度保持恒定在 1 g/mL。这意味着可以通过称量分配的水来确定水的体积。

但是，温度和气压的变化会影响测量的准确性。在实践中压力的影响可以忽略不计，但应考虑温度。这是使用 Z 系数或“Z 校正系数 ”完成的，该系数用于计算水量。

将计算体积与理论体积进行比较，您可以确定移液器的准确度。

表 1 显示了不同温度下蒸馏水的 Z 因子

三、移液器校准的步骤

注意：您应该使用两个不同的体积检查移液器的校准。

在烧杯中取蒸馏水并记录其温度。

根据移液器可以分配的小体积和大体积，收集您的移液器和正确的吸头。

将称量舟放在可精确称量微克范围的天平上，关闭天平门后将其归零。

通过抽吸和排出设定的体积 3 次预冲洗吸头，然后完全推动以去除任何残留的液体。

在不形成气泡的情况下吸入校准体积，然后将液体缓慢分配到称重舟中。然后，在天平上记录重量并重复该过程十次。

使用等式计算分配体积：
V = W x Z
其中，
W = 水的重量
Z = Z 因子（见表 1 ）
V = 计算的分配水体积。

接下来，确定十次试验的平均值。

可以使用以下公式计算准确度：
A = 100 x V avg /V 0
其中，
A = 移液器的准确度
V avg = 平均计算体积
V 0 = 您尝试分配的理论体积。

如果准确度值在 99-101% 范围内，则认为移液器正常并已校准。

注意事项：

测试环境的较大变化，如温度、湿度和大气压力，可能会影响校准过程中的蒸发，也可能导致测试不可靠。

在开始校准之前，将移液器调整到校准环境一个多小时也很重要。

如果我的移液器校准不当怎么办？

如果您的移液器准确度超过 99-101%，请停止使用移液器并与您的实验室经理或主管交谈。可能有现有的安排可以让您的移液器在内部或与公司一起进行维修和校准，以确保其正常运行。

在此期间，您可能需要安排使用替代移液器。确保在开始新实验之前检查此移液器的准确性。

我的移液器应该多久校准一次？

至少，每 3-6 个月检查一次移液器校准的情况。如果您要深度清洁移液器，可以在重新组装后进行检查。

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