细胞转染现在是分子生物学的核心技术，也是基因制药的必要前提。免疫穿孔转染法技术是用涂有抗体并与特定细胞表面跨膜蛋白结合的珠子如何在移除珠子时在细胞中产生孔，从而允许用 DNA 或其他大分子转染细胞。这种通过免疫穿孔对细胞进行的独特靶向转染非常有效，并且减少细胞凋亡。

免疫穿孔转染法的原理

  转染细胞有多种方法，比如电穿孔 、脂质转染 、磷酸钙共沉淀 和 DEAE葡聚糖等方法 . 在这些方法中，只有电穿孔提供了将 DNA 和其他分子（如蛋白质）引入活细胞的可能性。目前的方法都不能针对特定类型的细胞进行转染。在这种新的细胞转染方法中，抗体包被的珠子与特定的表面抗原结合，然后通过混合将珠子从细胞中剪下：这会在细胞膜上形成瞬时孔，大分子可以通过这些孔进入。粒细胞、分化的人淋巴母细胞 HL-60 细胞通常在其表面表达 CD71。当在二甲基亚砜 (DMSO) 存在下诱导分化时，细胞停止表达 CD71，而是表达 CD11b。

免疫穿孔细胞转染法的基本过程

将涂有抗 CD11b 抗体 (DYNAFECT-CD11b) 或抗 CD71 抗体 (DYNAFECT-CD71) 的 DYNAFECT 珠子在旋转的上下混合器上以 33 rpm 在 22 °C 下混合 6 小时，与未诱导的 HL- 60 个细胞或用 DMSO 诱导 3 天的细胞。为了在 2-ml 微量离心管中混合，可将 10 7 个磁珠和 5×10 5 个细胞悬浮在含有 0.2 μg 编码绿色荧光蛋白的质粒 DNA 载体 pEGFP-C1（4.7 kb）的 0.5 ml 转染培养基（Dynal AS）中。转染后，使用磁力分离器去除磁珠，将细胞转移回组织培养基中并在分析前再培养 48 小时。

   通过流式细胞技术来确定细胞转染的程度。 DYNAFECT-CD71 微珠促进 DNA 转染到正常的 HL-60 细胞中，但当细胞分化且不再表达 CD71 时，这些微珠不再发生转染。相反，将未分化的 HL-60 细胞与 DYNAFECT-CD11b 珠子混合不会导致细胞被 DNA 转染，但当细胞分化并开始表达 CD11b 时，这些磁珠确实会被转染。

    因此，免疫穿孔有可能靶向混合群体中特定类型的细胞进行转染，这取决于它们的免疫特性，并允许靶向细胞吸收各种不同的分子。这也发生在几种哺乳动物细胞系中，这些细胞系具有一系列针对选定细胞表面抗原的不同抗体。正常情况下，细胞转染水平为 40-80%，具体取决于混合条件，而无活力细胞的数量通常会少于20%。

  关于细胞转染 的其它相关问题，可以进入苏州阿尔法生物实验器材有限公司官网 或0512-62956104进行咨询。

苏州阿尔法生物实验器材有限公司成立于2008年，位于苏州园区生物纳米园（Biobay）A5幢301室。公司管理团队专注于科学仪器行业十八年，拥有专业的技术团队与完善的售后服务体系，目前已为300余家实验室提供优质产品和服务，涵盖各大高校、检测中心、科研机构、制药企业等13个群体。提供的实验室仪器主要包括振荡培养箱，恒温恒湿培养箱、二氧化碳培养箱、生化培养箱、霉菌培养箱、PCR仪，瑞宁移液器，生物反应器，发酵罐，超低温冰箱，液氮罐，高压灭菌器，超纯水机，天平，离心机，离心浓缩仪、研磨机、葡萄糖乳酸分析仪等。厂商企业授权包括梅特勒-瑞宁Rainin 、知楚&搏旅、海尔 、杭州朗基、上海天能胶成像仪、恒尔离心机,杭州奥盛、EKF葡萄糖乳酸分析仪、小鳄Gator 、耐思NEST、天根、 海星、哈爵雅消毒液等厂家；进口品牌包括：Thermo、METTLER TOLEDO、Eppendorf、PerkinElmer、Beckman、Merk Millipore、Agilent、BMG、Tecan、Sartorius等。