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文章标签: 外泌体 蛋白质 阿尔茨海默 生物试剂
外泌体是由正常或病理条件下的细胞所分泌，含有各种膜蛋白和胞质蛋白等蛋白质和核酸。因此，外泌体标志物也可以作为生物试剂潜在地用于蛋白诊断。 （图 2）。外泌体中发现的十种蛋白质主要包括热休克蛋白 8 (HSPA8)、CD63 抗原 (CD63)、β 肌动蛋白 (ACTB)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶 (GAPDH)、烯醇化酶 1 α (ENO1)、细胞溶质热休克蛋白 90 α (HSP90AA1)、CD9、CD81、酪氨酸 3-单加氧酶/色氨酸 5-单加氧酶激活蛋白、zeta 多肽 (YWHAZ)、肌肉丙酮酸激酶 (PKM2) 。
外泌体标志物蛋白
外泌体蛋白属于各种功能组，例如四跨膜蛋白（CD9、CD63 和 CD81）、热休克蛋白（HSC70 和 HSC90）、膜转运蛋白（GTPases）和脂质结合蛋白。
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蛋白质 |
编号 |
主要蛋白型号 |
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亚当10 |
26 |
Abcam ab124695 , R&D Systems MAB1427 , Santa Cruz Biotechnology sc-48400 |
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ATF3 |
21 |
Santa Cruz Biotechnology sc-188 , Abcam ab207434 |
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小窝蛋白-1 |
142 |
Cell Signaling Technology 3267 、BD Biosciences 610406 、Novus Biologicals NB100-615 |
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CD10 |
273 |
Invitrogen MA5-14050 , Leica Biosystems PA0271 , BD Biosciences 555373 |
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CD24 |
260 |
Invitrogen MA5-11828 、BD Biosciences 555428 、 BioLegend 311101 |
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CD26 / DPP4 |
39 |
BioLegend 302702 , BD Biosciences 555435, Invitrogen MA1-35147 |
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CD29 / ITGB1 |
502 |
BD Biosciences 610467 , EMD Millipore MAB2079Z , Abcam ab52971 |
|
CD49d |
110 |
BD 生物科学 555502, BioLegend 304302, Invitrogen 12-0499-42 |
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CD63 |
214 |
BD Biosciences 556019 、Santa Cruz Biotechnology sc-5275、 Abcam ab8219 |
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CD69 |
497 |
BioLegend 310902 , BD Biosciences 560740 , Invitrogen MA1-207 |
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CD81 |
114 |
BD Biosciences 555675 , Santa Cruz Biotechnology sc-166029 , Abcam ab79559 |
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CD9 |
177 |
Abcam ab92726, BD Biosciences 555370, Invitrogen AHS0902。 |
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克劳丁 |
138 |
Invitrogen 37-4900、Santa Cruz Biotechnology sc-81796 、Abcam ab180158 |
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表皮生长因子八 |
924 |
Cell Signaling Technology 4267 、Invitrogen MA1-12693 、Abcam ab52894 |
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恩姆普林 / CD147 |
59 |
Santa Cruz Biotechnology sc-71038, BD Biosciences 555962, BioLegend 306209 |
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胎球蛋白A |
3 |
圣克鲁斯 sc-137102 , 义翘神州 10318 -R001 |
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GPC1 |
6 |
圣克鲁斯 sc-365000, EMD Millipore MAB2600 |
|
GPRC5A |
1 |
细胞信号技术 12968 |
|
HSC70 / HSPA8 |
209 |
Santa Cruz Biotechnology sc-7298、Enzo Life Sciences ADI-SPA-815-D 、Abcam ab19136 |
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热休克蛋白70 |
29 |
BD Biosciences 610607、multimmune GmbH cmHsp70.1 、EMD Millipore MAB3516 |
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热休克蛋白90 |
416 |
Santa Cruz Biotechnology sc-13119 、Cell Signaling Technology 4877 、BD Biosciences 610418 |
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HSP90AB1 |
111 |
Santa Cruz Biotechnology sc-13119 、Invitrogen 37-9400、 Abcam ab32568 |
|
L1CAM |
59 |
Invitrogen MA5-14140 、Abcam ab24345、 MilliporeSigma L4543 |
|
MSN/莫辛 |
27 |
Abcam ab52490 , BD Biosciences 610401, Santa Cruz Biotechnology sc-13122 |
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NKCC2 |
6 |
发育研究瘤库 T4 , Abcam ab171747 |
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PDCD6IP / Alix |
54 |
Cell Signaling Technology 2171、Santa Cruz Biotechnology sc-53540、Abcam ab117600 |
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PSA |
31 |
Santa Cruz Biotechnology sc-7316、 Cell Signaling Technology 5365、Dako M0750 |
|
RAP1B |
1 |
细胞信号技术 2326 |
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抵抗素 |
2 |
研发系统 MAB13591 |
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生存素 |
176 |
Cell Signaling Technology 2808 、Santa Cruz Biotechnology sc-17779 、Novus Biologicals NB500-238 |
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TSG101 |
89 |
Santa Cruz Biotechnology sc-7964 、Abcam ab83 (20)、GeneTex GTX70255 |
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TYRP-2 |
5 |
圣克鲁斯 sc-74439 |
表 2。外泌体标记物及其在免疫组织化学、免疫细胞化学、流式细胞术和 ELISA 等抗体应用中的常用的单克隆抗体。
生物试剂 Tetraspanins 是常见的外泌体标志物。它们包括 CD9、CD63 和 CD81 膜蛋白。Tetraspanins 参与外泌体的产生。在抗原呈递细胞中，MHC-II 分子的功能通过它们整合到富含四跨膜蛋白 CD9 的细胞质膜区域中来调节。
CD63外泌体蛋白被认为是癌症的蛋白质标志物。此外，四跨膜蛋白家族的另一成员CD81在丙型肝炎的细胞进入中起重要作用。慢型丙型肝炎患者血清中的外泌体 CD81 会升高，表明 CD81 可能是丙型肝炎感染的标志物。
胶质母细胞瘤表皮生长因子受体 vIII (EGFRvIII) 被认为是胶质母细胞瘤的标志物。关于中枢神经系统，在脑肿瘤者血清中分离的外泌体中也检测到了 EGFR、EGFRvIII 和 TGFβ。
此外，外泌体还参与神经退行型症。在神经退行型症个体的脑脊液和外周血中已检测到几种特定于阿尔茨海默氏症、帕金森氏症和 Creutzfeldt-Jakob 的聚集蛋白。特别是，在从阿尔茨海默者的脑脊液样本中获得的外泌体中检测到 Thr-181 磷酸化的 tau。在 Thr-181 磷酸化的 Tau 是阿尔茨海默的既定生物标志物。此外， α-突触核蛋白也常在阿尔茨海默者的群体中检出。
此外，在尿液中发现的外泌体标志物也可以是膀胱和前列腺肿瘤的标志物。比如：视黄酸诱导蛋白 3 (GPRC5A) 、抵抗素、外泌体蛋白 PCA-3 、 TMPRSS2:ERG、 α1-抗胰蛋白酶、组蛋白 H2B1等。
除了脑和泌尿道肿瘤外，外泌体蛋白也可以是胰腺癌的标志物。比如：结直肠癌的外泌体蛋白标志物包括 EpCAM、cadherin-17、粘蛋白 13 (MUC-13)、角蛋白 18、claudins 和 ephrin B1。
外泌体核酸
通过对外泌体以及外泌体提取相关生物试剂的研究发现：外泌体除了蛋白质，外泌体还含有 RNA。外泌体 miRNA 可用于各种肿瘤的判断（图 3）。目前有八种 miRNA 被确定为卵巢癌的标志物。此外，据报道，肺腺癌者的血清和肿瘤样本中的 miRNA 会增加。前列腺癌的血清中外泌体 miRNA miR-141 和 miR-375 水平会升高。研究表明，外泌体 miRNA-21 的血清水平升高和 miRNA-1246 在 ESCC 群体中凸现。有趣的是，外泌体 miRNA 可能是肾纤维化和心血管症的潜在判断标志物。对于进行型退行型疾病，在阿尔茨海默者的生物体液中发现了几种 miRNA，如： miR-9、miR-107、miRNA-128、miRNA134 和 miRNA-137 miRNA124 的高表达水平。
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外泌体 miRNA |
判断与应用 |
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miR-21、-141、-200a、-200b、-200c、-203、-205、-214 |
卵巢癌 |
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miR-17、-3p、-21、-20b、-223、-301、let-7f |
肺癌 |
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miR-141、miR-375 |
前列腺癌 |
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miR-21、miR-1246 |
食管鳞状细胞癌 |
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C21 |
乳腺癌 |
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Let-7 家族 miRNA |
胃癌 |
表 3。外泌体 miRNA 标记。
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