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Q2000C 型 qPCR仪光通道偏移故障排查
作者: 朗基 Q2000C qPCR 仪 编辑: Q2000C 来源: ROX 模式绿色光异常修复指南 发布日期: 2025.04.21
信息摘要:
针对 Q2000C qPCR 设备光通道偏移的问题(如 ROX 模式下出现绿色光而非预期的黄色 / 橙色)该怎么办?

针对 Q2000C qPCR 设备光通道偏移的问题(如 ROX 模式下出现绿色光而非预期的黄色 / 橙色),结合设备特性和行业通用解决方案,以下是具体的排查步骤和建议:

一、硬件故障排查与处理

1. 光学系统校准

Q2000C 采用 SSLP™短光程静态荧光 CCD 成像技术,其光学系统通过固定滤光片和 LED 光源实现多通道检测。若出现光通道偏移,需重点检查以下环节:

滤光片状态:ROX 通道的滤光片(通常对应 570-600nm 波长)可能因长期使用或外力冲击发生物理偏移。需联系厂商工程师打开设备,检查滤光片支架是否松动或移位。

光源老化:设备采用长寿命 LED 光源,若使用超过 5 年或频繁高温运行,可能导致发光波长漂移。可通过以下方法验证:

光源自检:进入设备软件的 “系统设置” 或 “诊断” 菜单,执行 LED 光源强度测试。若 ROX 通道的 LED 强度显著低于其他通道,可能需更换光源模块。

光谱验证:使用光谱仪直接测量 ROX 通道的激发 / 发射波长,确认是否与标称值(如 570nm 激发,585nm 发射)一致。

2. 光路污染或遮挡

光路清洁:光学镜片、CCD 探测器表面可能积累灰尘或冷凝水,导致信号衰减或颜色偏差。需用无尘布蘸取异丙醇轻轻擦拭光路组件(注意:非专业人员切勿自行拆卸)。

样品台遮挡:检查样品台是否完全闭合,避免环境光干扰。若使用白色 PCR 管,需确认管盖无划痕或变形。

Q2000B英文

二、软件与参数调整

1. 通道配置检查

波长设置:进入设备软件的 “通道管理” 界面,确认 ROX 通道的激发 / 发射波长参数是否正确(通常为 570nm/585nm)。若参数被意外修改,需恢复默认值。

增益与偏移校准:

手动校准:使用标准荧光染料(如罗丹明 B)配制梯度浓度溶液,执行 “光信号校准” 程序,调整通道增益和偏移值。

自动校准:部分型号支持 “自动增益控制”(AGC),可尝试启用该功能优化信号强度。

2. ROX 校正设置

参比染料选择:若 ROX 信号异常,可尝试在软件中将参比染料从 ROX 切换为 NONE,观察荧光信号是否恢复正常。若切换后信号正常,可能是 ROX 染料浓度与仪器不匹配。

基线调整:在数据分析界面,手动调整基线范围(如设置为 Ct 值 - 4),避免背景噪音干扰。

Q2000A

、行业通用解决方案参考

1. 光信号校准流程

标准品准备:使用已知浓度的 ROX 染料(如 10nM)配制系列稀释液(10nM、1nM、0.1nM)。

校准程序:

1) 在设备软件中选择 “校准” 模式,选择 ROX 通道。

2) 依次加载不同浓度的 ROX 标准品,记录荧光强度值。

3) 生成标准曲线,验证线性范围(理论斜率应为 1.0)。

4) 根据曲线调整通道增益,使信号强度与浓度呈线性关系。

2. 常见故障对比表

现象

可能原因

解决方案

ROX 通道显示绿色光

滤光片偏移 / 光源老化

联系厂商校准或更换硬件

所有通道信号异常

光路污染 / CCD 故障

清洁光路或更换 CCD 探测器

荧光强度波动大

增益设置过高 / 环境光干扰

降低增益或检查样品台密封性

熔解曲线异常

ROX 浓度不匹配 / 基线设置错误

调整 ROX 浓度或重新设置基线范


、操作注意事项

环境控制:设备应放置在温度稳定(20-25℃)、无振动的环境中,避免频繁开关机。

耗材兼容性:优先使用朗基推荐的白色 PCR 管和光学封板膜,避免使用劣质耗材导致信号衰减。

l 定期维护:每季度执行一次光路清洁和温度校准,每年进行全面性能验证(如温度均匀性、荧光线性度)。

Q2000

苏州阿尔法生物为科研机构、生物医药企业及第三方检测中心提供 Q2000C 荧光定量 PCR 仪 分子生物学设备,生物试剂和实验耗材 Q2000C 外,朗基 Q1000 型荧光定量 PCR 仪(支持双通道同步检测,无需 ROX 校正)、梯度 PCR 仪及快速 PCR 仪,满足从基础研究到高通量检测的多样化需求。如果您在 Q2000C 使用过程中遇到光通道偏移、荧光信号异常等问题,或需要设备采购、技术咨询及维修报价请直接联系我们。



苏州阿尔法生物实验器材有限公司成立于2008年,位于苏州园区生物纳米园(Biobay)A5幢301室。公司管理团队专注于科学仪器行业十四年,拥有专业的技术团队与完善的售后服务体系,目前已为300余家实验室提供优质产品和服务,涵盖各大高校、检测中心、科研机构、制药企业等13个群体。提供的实验室仪器主要包括振荡培养箱,恒温恒湿培养箱、二氧化碳培养箱、生化培养箱、霉菌培养箱、PCR仪,瑞宁移液器,生物反应器,发酵罐,超低温冰箱,液氮罐,高压灭菌器,超纯水机,天平,离心机,离心浓缩仪、研磨机、葡萄糖乳酸分析仪等。厂商企业授权包括知楚仪器、朗基、中科美菱,梅特勒,乐枫,搏旅、NEST、天根、奥盛在内的80个余厂家。

四张拼图

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