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生物膜干涉技术(Bio-Layer Interferometry, BLI)作为一种非标记、实时检测技术,已于2021年被《美国药典》收录为分子互作检测方法之一,并在2024年被国家药监局药品审评中心(CDE)列入《抗体偶联药物药学研究与评价技术指导原则》,作为结合活性检测的规范方法。
作为苏州阿尔法生物实验器材有限公司 (bioalpha2008.com )重要供应产品Gator非标记BLI分子互作仪,凭借无流路设计、高通量检测和低样本消耗等优势,已在抗体药研发全流程中展现出5大核心应用价值。
亲和力测定是抗体药研发的基础环节。传统ELISA仅提供终点数据,无法反映结合/解离的实时动力学过程。SPR(Biacore)虽然精度高,但单次检测通量有限,每对分子约需1.5-2小时。
Gator BLI平台通过光纤生物传感器实时监测分子结合产生的干涉光谱变化,可在20分钟内完成一对分子的完整动力学分析(包括kon、koff、KD值)。其96/384孔板设计支持同时检测8-32个样本,显著提升筛选通量。据BioProcess International发表的技术文章,Gator新一代生物传感器在抗体-抗原亲和力检测中展现出更宽的动态范围和更高的灵敏度[1]。
在检测分析仪 领域,Gator BLI为抗体药研发提供了从粗样筛选到精确动力学验证的完整数据链。
表位分组(Epitope Binning)是抗体药物开发中筛选功能性抗体、优化联合用药策略的关键步骤。传统平台受限于板位空间和检测通量,难以同时处理大规模抗体组合。
Gator Pro系统配备32个独立光谱仪和3个384孔板位,可在8小时内完成复杂的32×32双向夹心或串联分组检测,获取完整表位图谱。Gator Prime仪器则凭借双托盘设计支持12×12分组实验,适合中小规模研究。这意味着研究者可在单日内获得可重复的竞争性结合数据,为联合用药策略提供指导[2]。
宾夕法尼亚大学医学院Daniel J. Powell Jr.教授团队在Cancer Cell(2025年IF=44.5)发表的研究中,正是利用Gator BLI技术快速验证了靶向KRASG12V突变肽的scFv结合物,获得了4个KD值在3-22 nM的高性能候选分子,且对野生型pMHC完全不结合——这一精度和速度在传统筛选方法中难以实现[3]。
在抗体药工艺开发中,快速准确的浓度定量是质量控制的刚需。传统ELISA需要数小时完成,且操作步骤繁琐。
Gator BLI的Protein A (ProA)探针可直接从细胞培养上清等粗样中定量IgG,检测灵敏度达到20 ng/mL,动态范围覆盖0.02-10000 μg/mL。8通道系统可在约30秒内完成8个样本的浓度测定,一天内可筛选96个克隆的表达水平。这种高通量、低消耗的定量能力,使Gator BLI成为细胞株开发阶段的理想工具。
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Fc受体(FcγRs、FcRn)和C1q的结合检测是抗体药效应功能优化和半衰期延长的核心环节。这类实验面临两大挑战:相互作用亲和力低、C1q复合物稳定性差。
Gator BLI平台通过高采样频率检测和样品冷却功能,可有效处理pH依赖性结合及不稳定复合物的分析需求。其非标记实时分析可精准检测FcγR、FcRn及C1q的结合动力学,即使是低亲和力相互作用也能获得可靠数据。样本板设计支持大规模Fc变体筛选,可同时评估多个工程抗体库在不同条件下的结合表现[4]。
这与传统SPR需要大量样本和复杂前处理形成鲜明对比。义翘神州的技术数据显示,BLI与SPR在Fc受体亲和力检测中均可获得可靠数据,但BLI在样本兼容性和检测通量上具有显著优势[5]。
细胞系开发是抗体药生产的第一步。选择合适的CHO或杂交瘤克隆需要同时评估表达滴度、结合亲和力、特异性和稳定性——传统方法需要多轮ELISA和功能检测。
Gator BLI平台通过单次检测即可实现数量与质量特性的同步筛选,直接对细胞培养上清中的目标抗体进行定量(灵敏度20 ng/mL)和结合动力学分析。这使研究者能在早期阶段快速区分潜力候选分子,显著缩短筛选周期。Gator高通量系统可一天内评估96个克隆的结合动力学、表达水平和特异性,为研发决策提供数据支撑。
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对比维度 |
Gator BLI |
Biacore (SPR) |
Octet (BLI) |
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检测原理 |
生物膜干涉 |
表面等离子共振 |
生物膜干涉 |
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进样方式 |
浸入式,无流路 |
连续流动,易堵塞 |
浸入式,无流路 |
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维护成本 |
免维护 |
流路维护成本高 |
较低 |
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单次通量 |
8-32通道 |
4通道 |
8-16通道 |
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粗样兼容 |
直接检测粗样 |
需纯化 |
直接检测粗样 |
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表位分组 |
8h完成32×32 |
通量有限 |
支持但效率较低 |
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浓度定量灵敏度 |
20 ng/mL |
较高但流程复杂 |
约1-10 μg/mL |
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法规收录 |
美国药典(2021) |
多国药典 |
美国药典(2021) |
从上表可见,Gator BLI在维护成本、通量效率和粗样兼容性方面具有明显优势。对于抗体药研发中需要快速筛选大量样本的场景,Gator BLI的免维护设计和高通量特性可显著降低运营成本和时间投入。
苏州阿尔法生物
作为Gator Bio(小鳄生物)的重要合作商,提供Gator BLI分子互作仪现货供应及安装调试服务。公司拥有18年实验室仪器供应经验,服务覆盖苏州及长三角地区生物制药、科研高校等客户群体。
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[1] BioProcess International. Accelerating Antibody Discovery through Gator BLI Biosensor Technology. 2023.
[2] Gator Bio. Epitope Binning and Mapping Application Note. gatorbio.cn, 2024.
[3] Powell DJ Jr. et al. Mutant KRAS peptide targeted CAR-T cells engineered for cancer therapy. Cancer Cell. 2025;43(5).
[4] Gator Bio. Fc Receptor and C1q Optimization Application. gatorbio.cn, 2024.
[5] 义翘神州. 分子互作技术在生物药研发中的应用. sinobiological.com, 2023.
苏州阿尔法生物实验器材有限公司成立于2008年,位于苏州园区生物纳米园(Biobay)A5幢301室。公司管理团队专注于科学仪器行业十八年,拥有专业的技术团队与完善的售后服务体系,目前已为300余家实验室提供优质产品和服务,涵盖各大高校、检测中心、科研机构、制药企业等13个群体。提供的实验室仪器主要包括振荡培养箱,恒温恒湿培养箱、二氧化碳培养箱、生化培养箱、霉菌培养箱、PCR仪,瑞宁移液器,生物反应器,发酵罐,超低温冰箱,液氮罐,高压灭菌器,超纯水机,天平,离心机,离心浓缩仪、研磨机、葡萄糖乳酸分析仪等。厂商企业授权包括梅特勒-瑞宁Rainin 、知楚&搏旅、海尔 、杭州朗基、上海天能胶成像仪、恒尔离心机,杭州奥盛、EKF葡萄糖乳酸分析仪、小鳄Gator 、耐思NEST、天根、 海星、哈爵雅消毒液等厂家;进口品牌包括:Thermo、METTLER TOLEDO、Eppendorf、PerkinElmer、Beckman、Merk Millipore、Agilent、BMG、Tecan、Sartorius等。
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