苏州阿尔法生物实验器材有限公司

14年专注生物实验室仪器设备&耗材综合供应

0512-6295610418934597460

阿尔法累计赢得1000+企业的信赖和认可
一种高灵敏度的免疫检测方法-免疫PCR
作者: 苏州阿尔法生物 编辑: 苏州阿尔法 来源: ELISA试剂盒价格 发布日期: 2022.05.04
信息摘要:
关键词: 抗体  科普  pcr 荧光定量pcr 免疫PCR  酶联免疫ELISA  。多年来,研究人员一直依赖免疫检测技术,如蛋白质印迹、…

关键词:抗体  科普  pcr 荧光定量 pcr 免疫PCR  酶联免疫 ELISA

   多年来,研究人员一直依赖免疫检测技术,如蛋白质印迹、流式细胞术和酶联免疫吸附试验 (ELISA) ,但 免疫 PCR 是一种相对较新的方法。通过将 酶联免疫 ELISA 与聚合酶链式反应 (PCR) 相结合,免疫 PCR 提供了 较高 水平的检测灵敏度。

酶联免疫PCR

酶联免疫吸附试验

ELISA 是一种将分子吸附到固体表面(通常是微孔板孔)上的测定。从广义上讲,存在三种不同类型的 ELISA。抗原下降 ELISA 是一种抗原与微孔板结合的方法。相比之下, ELISA 依赖于将适当的捕获抗体吸附到微孔板孔中,然后在用另一种抗体检测之前从样品中吸附抗原。第三种形式,竞争 ELISA,当分析物很小且不能同时与两种不同的抗体结合时 有用。它通常使用抗原向下设置。ELISA 操作简单,运行相对 简单 ,并且很容易适应高通量筛选。

聚合酶链反应

PCR 是一种用于扩增特定 DNA 片段的技术,只需少量的起始材料即可进行。它采用三步循环过程:1) dsDNA 的热诱导变性以分离两条互补链,2) 降低温度以允许 PCR 引物结合,3) 使用 DNA 聚合酶产生目标 DNA 的互补拷贝顺序。在传统 PCR 过程中,扩增的 DNA 在凝胶上运行并用溴化乙锭染色。实时 PCR (rtPCR) ,也称为定量 PCR (qPCR) ,而是将 PCR 产物的产生与荧光强度相关联,在检测发生时生成数据。 rtPCR 灵敏度 高,动态范围大。

免疫 PCR :两全其美

只要有合适的抗体试剂可用,ELISA 就可以检测任何蛋白质,但是它可能不够灵敏,无法识别低丰度的蛋白质。虽然 rtPCR 提供指数信号放大,但它不能直接用于抗原检测,因为它不使用抗体。免疫 PCR 通过抗体-寡核苷酸偶联物结合了这两种检测形式。您可以将任何类型的 ELISA 转化为免疫 PCR 检测,只需将检测抗体替换为抗体-寡核苷酸偶联物即可。

    例如,典型的ELISA 要求对目标分析物具有特异性的抗体固定在微量滴定板的表面上。通过洗涤去除未结合的抗体,并在封闭步骤之后添加样品。孵育后,洗去 表面 未结合的样品,然后添加第二种分析物特异性抗体。如果使用直接检测方法,该抗体将与检测部分结合,例如酶或荧光染料。相反,间接检测涉及另一轮洗涤步骤,然后添加缀合的抗物种二抗。

要将具有直接检测的 ELISA 转换为免疫 PCR 测定,只需将第二种抗原特异性抗体替换为抗体- 寡核苷酸偶联物。在洗涤步骤之后,可以通过 rtPCR 扩增和检测 DNA

ELISA 转化为免疫 PCR 检测

在开发免疫 PCR 检测时,调整现有的 ELISA 是有效的方法 。应优化测定的每个步骤 max 以特定读数,同时 min 背景信号。对于等效 ELISA,可能已经知道诸如板包被方法、洗涤缓冲液和封闭溶液的类型、样品孵育步骤的长度和抗体的选择等因素。

任何免疫测定的成功都取决于抗体试剂的质量,但如果配置 正确,免疫 PCR 与其他测定形式相比具有许多优势:


  • 高度灵敏—— 可以检测皮克-飞克量的分析物
  • 只需要少量样品
  • 与血清或尿液等复杂样品兼容
  • 可重现
  • 提供多路复用选项
  • 抗体- 寡核苷酸偶联物的产生


  抗体- 寡核苷酸偶联物的生产成本可能 高,因为传统的偶联方法需要大量的抗体,并且在纯化步骤中会产生重大损失。然而,免疫 PCR 正变得越来越容易获得,因为 目前可以使用市场上的 的抗体- 寡核苷酸偶联试剂盒、酶联免疫ELSIA 试剂盒等。

为什么切换到免疫 PCR

与其他免疫检测方法相比,免疫 PCR 提供了 高的灵敏度。这使其成为检测复杂样品中低丰度分析物的 有效工具 ,因为样品材料可以 大幅度 稀释,从而降低背景影响并提高分析性能。该技术还 提供一致且可重复的数据。

苏州阿尔法生物提供的免疫PCR 试剂包括: ELSIA试剂盒、酶联免疫ELSIA试剂盒、抗体、一抗、二抗、蛋白检测试剂盒、PCR引物、PCR、QPCR相关生物试剂。0512-62956104或18934597460

 

更多产品内容请咨询:0512-62956104  或  18934597460


苏州阿尔法生物实验器材有限公司成立于2008年,位于苏州园区生物纳米园(Biobay)A5幢301室。公司管理团队专注于科学仪器行业十三年,拥有专业的技术团队与完善的售后服务体系,目前已为300余家实验室提供优质产品和服务,涵盖各大高校、医疗机构、检测中心、科研机构、制药企业等13个群体。提供的实验室仪器主要包括振荡培养箱,PCR仪,移液器,生物反应器,发酵罐,移液器,超低温冰箱,医用冰箱,液氮罐,高压灭菌器,超纯水机,天平,离心机,离心浓缩仪,生物安全柜等。厂商企业授权包括知楚仪器、朗基、中科美菱,梅特勒,乐枫,搏旅、NEST、天根、奥盛在内的80个余厂家。

  在提供产品的同时也为您提供生物实验室常用的耗材试剂,以及实验室整体搬迁、第三方检测、计量与校准,二手仪器调剂等服务。完整的实验室一站式体验使您的选择更加方便、快捷、灵活。 

  阿尔法性价比:一级代理;一手货源;进口品质,国产价格; 

  阿尔法交货期:自有仓库,标准品有库存,常规试剂耗材备有现货;  

 阿尔法服务项目:实验室现场规划,提供选型建议,合理化配置; 

  阿尔法售后服务:及时响应,2小时给出解决方案,12小时内响应服务。

  阿尔法增值服务:免费供样机体验,免费提供样品试用,免费安装指导,免费技术指导  

  阿尔法质保期:终身质保,免费更换配件

四张拼图

【相关推荐】

阿尔法推荐资讯

瑞宁移液器吸头促销—开学季大礼包

瑞宁移液器吸头促销—开学季大礼包

瑞宁移液器开学季促销:买三送一,买十送一。
2021-08-31
我们正青春

我们正青春

时值青春我们有什么资格不努力?风华正茂我们有什么理由不奋起?!
2021-09-30
苏州阿尔法生物

佳肴是辛勤的果实,美味是汗水的结晶!-----苏州阿尔法生物团建

佳肴是辛勤的果实,美味是汗水的结晶!每一份喜悦都意味着我们曾默默努力付出过。每一份喜悦都折射出团结、沟通、协调与努力所散发的光芒。
2021-04-30

咨询热线

0512-62956104