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细胞悬浮培养应该怎样选择哪种培养基?
信息摘要:
利用生物反应器进行悬浮细胞培养扩大来生产蛋白类抗体的时候,培养基的选择很重要。针对不同基因表达的蛋白所选用的细胞、培养基、细胞培养方式也不一…

我们知道利用生物反应器进行细胞扩培来生产蛋白类抗体的时候,培养基的选择很重要。针对不同基因表达的蛋白所选用的细胞、培养基、细胞培养方式也不一样。

细胞培养基

(上图为:细胞传代培养常用的培养基)

在生物反应器批量生产细胞时,培养基的选择一般可以依据以下条件来选择合适的培养基:

一、根据细胞特点进行选择

每种细胞的生长环境不同,所需要的营养物质配比也不尽相同。尽管改良型培养基已包含大多数细胞所需的营养物质,但是有些特殊细胞的生长及细胞产物特性也决定了培养基中组分调整。比如多数代谢水平一般的CHO哺乳动物细胞适宜使用DMEM高糖培养基,而干细胞培养则需要使用低糖型的DMEM。由于酚红具有类固醇激素,所以在进行哺乳类细胞培养,也通常不会选择含酚红的培养基。

二、根据蛋白表达及病毒特点进行选择

不同的蛋白表达产物所使用的接种细胞和对应的培养基要求也是不同的,选择的时候需要根据生产工艺及目的产物的细胞株来选择合适的培养基。比如培养杆状病毒使用LB培养基效果表现较好,而在动物细胞培养方面,DMEM类培养基则具有较多的优势。

三、根据培养方式来选择

不同的培养方式使用的培养及也会有所区别,贴壁细胞的培养基中必需含有血清才能使细胞旺盛生长,而悬浮细胞培养可以不加入血清。培养基中的M199RPMI-1640在动物细胞、肿瘤细胞的悬浮培养中使用较为广泛。

培养基

总之,合适培养基的选择主要遵循以下原则:

1.以提升细胞活力及细胞生长密度为基础

细胞活力与细胞的生长密度决定着细胞的产量与质量,适宜的培养基可为细胞提供充足的营养来源和生长环境。当细胞生长迅速,细胞活力旺盛说明选择培养基与细胞匹配度较高,可以积累为实验数据作为下次实验的参考。

2.提高单位体积培养液中病毒量或抗体表达量为目标。
生物抗体的表达滴度是衡量生产效率的标准,较高质量的病毒产量及表达滴度,离不开上游工艺中的细胞培养环节,可以通过细胞筛选、细胞系建立、生长状态分析、集落群体分析等方式来选择匹配度处于优势的培养基。
3.以提升培养基安全性能,降低整体生产成本为主要优化方向。

使用生物反应器进行细胞培养的过程基本上已经进入到了初试、中试甚至批量生产阶段。这个时候培养基的使用显得尤为重要,因为稍微疏漏的因素可能导致巨量成本的损失。如果采用的廉价的低成本培养基不仅具有较多的产品安全隐患还可能会造成下游的产物纯化工序工作量增加,导致生产成本加大。所以在进行培养基选择时,尽量保持选用质量稳定、技术实力较强、值的信赖的品牌产品。一般情况下培养基的选择在细胞筛选或摇瓶培养阶段经确定后,放量扩培时,尽量不要轻易改动培养组分,以免造成不必要的损失。

苏州阿尔法生物13年专注于生物实验室仪器设备与实验室试剂耗材的专业供应,实验室仪器中所供应的生物反应器可用于灌流培养、固定床式培养、搅拌通气式培养、悬浮培养、贴壁培养等多种细胞培养工艺。在 细胞培养 、微载体培养、微生物培养、生物制药等领域被广泛应用,同时我们还提供细胞培养基、血清、培养添加剂、细胞培养瓶、培养皿、摇瓶等细胞培养类的试剂耗材  

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