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生物反应器规模化培养CAR T 细胞的应用技术
作者: 苏州阿尔法生物 编辑: 阿尔法 来源: 阿尔法生物 发布日期: 2022.03.02
信息摘要:
近年来,随着生物科学技术的不断发展,细胞疗法逐渐成为热门话题, CAR T疗法属于细胞疗法的一种,它是通过基因改造,准确制导的方式来抑制或杀…

     近年来,随着生物科学技术的不断发展,细胞疗法逐渐成为热门话题, CAR T疗法属于细胞疗法的一种,它是通过基因改造,准确制导的方式来抑制或杀死肿瘤细胞。 CAR T 细胞规模化培养主要是利用生物反应器进行体外培养,生物反应器培养技术通过对细胞的生长环境(比如:温度、营养物质、通气量、产物、pH、机械要求和流速等)进行自动监测与调控,从而实现细胞规模化培养的生物技术过程。

什么是T细胞?T细胞培养的注意事项有哪些?

T细胞是人体免疫力的重要组成,它属于淋巴细胞的一种,所以也被称为T淋巴细胞。T细胞作为B细胞的辅助,在免疫系统中主要执行的是分化为效应细胞来执行细胞免疫的功能

     T 细胞的经过转接后,可以起到抑制肿瘤细胞生长的作用。CAR T 细胞改造主要是通过从肿瘤活检中分离 TIL进行清洗和浓缩,然后再通过生物反应器进行倍数扩增。所以,CAR T 细胞疗法是基于 T 细胞受体 (TCR) 或嵌合抗原受体 (CAR) 生物工程技术。通过这种方法,来自其他癌症患者的正常 T 细胞通过单采分离并转导以产生 TCR CAR T 细胞。

在这种方法中需要注意以下几点:

1.必须执行激活程序以允许制造的T细胞的转导和增殖。

    T细胞激活和增殖的完整环境包括抗CD3抗体和外源性IL-2,以及作为养细胞的外周血单核细胞。这种组合被也被称为“快速扩展协议REP。有些机构也在尝试用额外的培养基补体(IL-7IL-15、抗CD28抗体)以及使用专注于pp65蛋白的肽混合物进行预刺激,从而进一步提升T细胞的增殖率。

2. 用于有效治疗的T细胞亚群尚未确定。

    在CAR-T细胞疗法中,由于CD4+CD8+T细胞常常是混在一起进行基因编辑所以CD4+CD8+可以同样被激活,并且具有细胞裂解相关活性。由于T细胞活化涉及许多因素。T细胞亚群难以确定。所以,任何涉及活化步骤的生物反应器都应评估其对T细胞与抗原呈递相互作用的影响。例如,生物反应器的搅拌速率,PO值、PH值等都会影响到T细胞活化。这就对细胞培养系统的标准化及各项参数都提出了更为严格的要求。

细胞疗法

生物反应器进行规模扩增的优势?

1.细胞扩增效率得以提升

生物反应器进行细胞培养主要目的在于:一方面是在单位体积内提升动物细胞的有效培养密度,从而达到细胞增产的效果,来生产蛋白、抗体或载体;另一方面还可以创造类似于体内环境的细胞增殖系统来培养稀缺的,增长缓慢的价值细胞。通过实践,细胞生物反应器大规模细胞扩增的主要方式有贴壁培养、片状载体培养和全悬浮培养。与摇瓶培养相比,生物反应器在细胞的扩增速度、细胞群的稳定性、细胞成活率等方面都有着明显的优势。目前已广泛用于创新药研发、基因药物生产等领域。

2.可以节约生产成本和保证细胞质量

由于细胞生物反应器可以提供细胞培养的稳定环境,通过PID微电子控制系统,全程自动监控影响细胞生长的各项因素,并及时生成数据化分析报告反馈并调整。

3.促进符合良好生产规范(GMP)的协议

由于当前T细胞扩增方案属于高劳动强度,所以促进确保GMP的过程非常重要。生物反应器通过自动化及密闭设计从本质上避免了细胞群在扩增期间暴露于外部环境所造成的污染,这样的自动化、过程控制和完整的封闭系统也满足和促进了GMP规范要求,培养系统采用电子签名,均符合GMP审核要求。

苏州阿尔法生物实验器材有限公司13年专注于生物反应器,发酵罐、PCR仪、凝胶成像、移液器等实验室仪器设备供应生物反应器 采用进口零部件,三重防污染密封设计工艺,有2L/5L/15L/75L/150L/200L等多种规格可以供选择,另外支持特殊定制已适应不同类型的客户,具有价廉质优、售后有保障基本实现了进口生物反应的国产化替代。咨询电话0512-62956104.

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