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浅谈 HEK293 细胞

作者: Alpha 编辑: 苏州阿尔法生物 来源: 网络 发布日期: 2021.11.29
信息摘要:
如果您完全熟悉细胞培养,您可能听说过 HEK293 细胞。HEK293 细胞新药实验室中 较为常用的细胞系之一。但它们是什么?为什么要使用它…

如果您完全熟悉细胞培养,您可能听说过 HEK293 细胞。HEK293 细胞新药实验室中 较为常用的细胞系之一。但它们是什么?为什么要使用它们?“293” 是什么意思?与HEK293T 细胞相同吗?请继续阅读这些问题的答案以及更多内容。

一、什么是 HEK293 细胞?

HEK293 细胞是人类胚胎肾细胞,起初由荷兰生物学家 Alex Van der Eb 在 1970 年代初期分离和培养。Van der Eb 实验室的博士后 Frank Graham 用剪切的腺病毒 5 (Ad5) DNA 进行转染 。这是他们的第 293 次实验,所以就命名该细胞系为 HEK293 ,盖细胞系的主要作用是通过细胞的基因改造实现重组蛋白合成。那么,HEK293T 细胞与HEK293是同一种细胞吗?

其实,并不完全是,因为系HEK293T细胞的来源是将 SV40 大 T 抗原整合到 HEK293 基因组中——这意味着它们能够从携带 SV40 复制起点的质粒载体中产生大量蛋白质。 

HEK293t

二、HEK 细胞有何优点?

使用 HEK293 细胞有很多优点。它们是一种耐寒、半贴壁、低维护的细胞系,分裂迅速,大约每 36 小时可以增长 1倍。培养的细胞既能用于瞬时和稳定表达,也可悬浮培养或作为单层培养,比较容易转染,并且能够产生大量的 重组蛋白。

目前,HEK293 细胞主要用于癌症研究、新药开发、抗体蛋白生产、信号转导和蛋白质相互作用研究等领域。

三、 HEK293 细胞的分类

HEK293 细胞已被用于创建具有特定用途的各种衍生细胞系。

表 1:HEK293 细胞的一些常用衍生物。

衍生物

特征

293-F

快速成长;悬浮生长;在无血清培养基中生长

293-H

快速成长;悬浮生长;在无血清培养基中生长;在斑块检测中具有良好的依从性

293T

高转染性;包含 SV40 T 抗原

293

293-F 细胞系的衍生物;快速增长;包含 SV40 T 抗原

293E或239-EBNA1

表达 EBNA-1 蛋白

四、HEK293的生长条件

HEK293 细胞生长对培养环境要求不高。一般情况下维持 37°C 和 5% CO 2的加湿培养箱及充足的培养基供应即可满足 ,为防止细菌感染,必要时可添加少许抗生素,比如:青霉素-链霉素-谷氨酰胺等。细胞转染方式可以建议使用HEK293 转染试剂盒,操作方便、简单。

HEK293细胞转染试剂盒

五、HEK293 细胞培养注意事项

1.HEK293在进行传代培养时,长期培养会导致细胞活力下降,所以培养代数不宜过多,通常培养的代数维持在13代以下,如果选择的细胞系超过20代,需要需要解冻新的细胞重新开始。

2.实验操作过程中需要注意无菌操作,避免支原体感染,同时做好定时检测。

3.由于HEK293 细胞系的衍生物较多,所以培养时需要根据实验选择合适的细胞系进行培养。


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