苏州阿尔法生物实验器材有限公司

13年专注生物实验室仪器设备&耗材综合供应

0512-6295610418934597460

阿尔法构建全服务链体系 尊享高于原厂服务的价值
浅谈蛋白电泳和聚丙烯酰胺凝胶-SDS
作者: 苏州阿尔法 编辑: 苏州阿尔法生物 来源: 苏州阿尔法生物实验器材 发布日期: 2022.03.24
信息摘要:
聚丙烯酰胺凝胶SDS内部的聚合形成了一个交联的微孔网络。这种孔隙网络允许小蛋白质分子快  速通过,同时减缓较大蛋白质的迁移。这导致基于其分子…

   蛋白电泳是研究蛋白质性质的一种相对简单、快速和高灵敏度的工具。它是分析化学、生物化学和分子生物学的主要工具。通过电泳分离蛋白质是基于这样一个事实,即带电分子将在施加电场时通过基质迁移。蛋白质电泳分离的基质是聚丙烯酰胺。 用于形成聚丙烯酰胺的化学试剂是单体丙烯酰胺和N,N'-双丙烯酰胺(双-丙烯酰胺)。聚合丙烯酰胺和双丙烯酰的方法是使用 TEMED(四*基乙二胺)和过硫酸铵。聚丙烯酰胺凝胶内部的聚合形成了一个交联的微孔网络。这种孔隙网络允许小蛋白质分子快  速通过,同时减缓较大蛋白质的迁移。这导致基于其分子大小的蛋白质分离。

蛋白电泳

      聚丙烯酰胺凝胶基质中孔的大小由每单位体积使用的总丙烯酰胺的量和使用的双丙烯酰胺的相对百分比确定。聚丙烯酰胺凝胶的有效范围在3-30%之间。

      SDS PAGE(SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳)存在两种根本不同类型的凝胶系统,非解离(非变性)和解离(变性)。非解离(非变性)系统旨在在保留蛋白质功能和活性的条件下分离天然蛋白质。相比之下,解离系统旨在将蛋白质变性为其成分的多肽,从而检查样品的多肽组成。变性系统可能是最常用的,被称为 SDS-PAGE。

     SDS-PAGE 蛋白质鉴定过程中使用的 SDS 代表十二烷基硫酸钠,一种阴离子去污剂,可使蛋白质变性并将每个多肽链展开成线性方向。SDS 还根据其质量对每种蛋白质施加均匀分布的负电荷。

        在 SDS-PAGE 中,蛋白质混合物通过在 100°C 下在过量 SDS 存在下加热而变性,并使用还原剂(β-巯基乙醇、TCEP、DTT)来破坏二硫键。在这些条件下,所有还原的多肽结合相同量的 SDS(1.4g SDS/g 多肽),与蛋白质的氨基酸组成和序列无关。SDS-蛋白质复合物形成一个杆,其长度与蛋白质的分子量成正比。所有蛋白质现在都带负电荷,电荷密度相似,因此可以仅根据它们的大小进行分离。

SDS-PAGE 主要用于以下目的:

1. 蛋白质大小的估计。

2. 蛋白质亚基或聚集结构的测定。

3. 蛋白质纯度的估计。

4. 蛋白质定量。

5. 监测蛋白质完整性。

6. 比较不同样品的多肽组成。

7. 分析多肽亚基的数量和大小。

8. 蛋白电泳后应用,例如蛋白质印迹。   

SDS凝胶

实验中的SDS-PAGE使用DIY自行配置的话需要1个小时左右,比较耗时费力,目前很多实验室为了提升实验效率一般选用提前配置好的预制胶,比如天能的Biofuraw Precast Bis-Tris Gel 系列预制胶,在电泳过程中有效避免了Tris-甘氨酸SDS-PAGE凝胶所出现的“外八”现象,跑胶效果稳定均一。在节约用户时间的同时,也保证了实验的质量。 

苏州阿尔法生物所提供的SDS蛋白电泳预制胶、梯度预制胶、电泳仪、电泳槽、核酸电泳预制胶、核酸电泳仪、电泳仪电源、电泳槽等实验室设备。0512-62956104.


 

更多产品内容请咨询:0512-62956104  或  18934597460


苏州阿尔法生物实验器材有限公司成立于2008年,位于苏州园区生物纳米园(Biobay)A5幢301室。公司管理团队专注于科学仪器行业十三年,拥有专业的技术团队与完善的售后服务体系,目前已为300余家实验室提供优质产品和服务,涵盖各大高校、医疗机构、检测中心、科研机构、制药企业等13个群体。提供的实验室仪器主要包括振荡培养箱,PCR仪,移液器,生物反应器,发酵罐,移液器,超低温冰箱,医用冰箱,液氮罐,高压灭菌器,超纯水机,天平,离心机,离心浓缩仪,生物安全柜等。厂商企业授权包括知楚仪器、朗基、中科美菱,梅特勒,乐枫,搏旅、NEST、天根、奥盛在内的80个余厂家。

  在提供产品的同时也为您提供生物实验室常用的耗材试剂,以及实验室整体搬迁、第三方检测、计量与校准,二手仪器调剂等服务。完整的实验室一站式体验使您的选择更加方便、快捷、灵活。 

  阿尔法性价比:一级代理;一手货源;进口品质,国产价格; 

  阿尔法交货期:自有仓库,标准品有库存,常规试剂耗材备有现货;  

 阿尔法服务项目:实验室现场规划,提供选型建议,合理化配置; 

  阿尔法售后服务:及时响应,2小时给出解决方案,12小时内响应服务。

  阿尔法增值服务:免费供样机体验,免费提供样品试用,免费安装指导,免费技术指导  

  阿尔法质保期:终身质保,免费更换配件

四张拼图

阿尔法推荐资讯

我们正青春

我们正青春

时值青春我们有什么资格不努力?风华正茂我们有什么理由不奋起?!
2021-09-30
瑞宁移液器吸头促销—开学季大礼包

瑞宁移液器吸头促销—开学季大礼包

瑞宁移液器开学季促销:买三送一,买十送一。
2021-08-31
细胞培养

细胞培养前景怎么样-细胞培养的机遇与挑战有哪些?

在制药行业,细胞培养已成为抗体生产的重要组成部分。细胞培养技术已被用于生产轮状病毒、脊髓灰质炎、天花、肝炎、风疹和水痘等相关抗体。基于细胞的流感抗体也已获准在美国和许多欧洲国家使用。那么细胞培养前景怎么样?
2022-03-08

咨询热线

0512-62956104