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CHO细胞系家族,你了解多少?
作者: 苏州阿尔法生物 编辑: 苏州阿尔法 来源: 苏州阿尔法官网 发布日期: 2021.11.18
信息摘要:
CHO细胞是现代制药企业进行研发、生产常用一种细胞,那么CHO细胞家族到底有多大呢?有哪些分类呢?需要如何选到合适的细胞细胞株进行生产呢?

细胞是构建生命体的基础,随着科技的发展,细胞在生物制药,生命科学等相关领域也有着至关重要的地位。性能稳定、活力旺盛、高产能的细胞株不仅可以起到简化生产工艺的作用,还能节约生产成本。CHO细胞是现代制药企业进行研发、生产常用一种细胞,那么CHO细胞家族到底有多大呢?有哪些分类呢?需要如何选到合适的细胞细胞株进行生产呢?

下面小编一起带你来了解一下这个强大的家族吧。


CHO细胞

CHO细胞的背景

CHO细胞中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary)的简称。

在民国时期1919年,北京协和医学院的E.T. Hsieh博士在进行医学研究时,初次发现野生的中国仓鼠的实验价值,于是进行饲养研究,准备训化它们成为实验动物品系。后经过多次实验驯养均失败。直到1949Victor Schwentker经过两年的驯养,成功地把它变成一种实验室动物的品系。

 1957年,Puck实验室通过组织酶解消化技术成功分离出CHO细胞株,次年经过连续传代细胞重新克隆后建立完整的CHO原始细胞系。

  起初的CHO细胞系在培养时需要添加proline脯氨酸)才能良好生长,虽然CHO细胞后来流转到各生物公司进行实验研究,但始终保留了脯氨酸缺陷型这一特性。

由于不同的实验环境及筛选培养方式的不同,CHO细胞在细胞形态、生长方式、表达方式、基因组、新陈代谢等方面也出现了差异化,逐渐演变成许多不同的细胞系。


CHO细胞

CHO细胞的分类

目前常用的CHO细胞系主要有以下几种:

CHO-K11970Puck实验室通过原始CHO细胞系进行亚克隆存放于ATCCCCL-61系列中。

随后在1985年通过ATCC CHO-K1亚克隆被分离并保存于ECACC85051005中,此时细胞系开始用于制药或重组蛋白的表达。CHO-K1细胞系的培养方式采用的是贴壁培养,并且需要在培养基中添加血清,才能保证细胞良好生长。

后来Lonza生物公司将ECACC CHO-K1通过多年改造训化,建立CHO K1SVLonza2002细胞株使其适应无血清培养基悬浮培养,被广泛应用在GS表达平台

Merck公司在2006通过ECACC获得CHO-K1细胞株,并进行悬浮驯化建立了CHOZN CHO K1Merck2006细胞株,该细胞株可以生长在化学成分限定培养基中,降低了培养成本。基于CHO-K1的细胞系主要采用的蛋白筛选系统为GS(谷氨酰胺合成酶)和抗生素筛选系统在筛选效率上也有所提高。目前多个已经上市的治疗性蛋白多数是基CHO-K1细胞进行开发生产的。

Thompson实验室1973年通过原始CHO细胞系 分离并建立CHO-S细胞株,后Gibco公司将该细胞株驯化至CD CHO培养基中并建立了GMP细胞库,由于CHO-S因可以在无血清培养基中高密度悬浮培养,所以在早期常多用用瞬时表达宿主细胞。

除以上常用细胞外,还有单DHFR基因被敲除CHO-DXB11细胞株也常用作宿主细胞;

Chasin实验室生产的CHO-DG44细胞株;

后来Lonza公司也2012年推出CHO细胞 GS双等位基因敲除CHOK1SV GS-KO细胞株。进一步提升了筛选效率,缩短了稳定细胞株的开发周期,使细胞的克隆生产稳定性得以增强。

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