细胞是构建生命体的基础，随着科技的发展，细胞在生物制药，生命科学等相关领域也有着至关重要的地位。性能稳定、活力旺盛、高产能的细胞株不仅可以起到简化生产工艺的作用，还能节约生产成本。CHO细胞是现代制药企业进行研发、生产常用一种细胞，那么CHO细胞家族到底有多大呢？有哪些分类呢？需要如何选到合适的细胞细胞株进行生产呢？

下面小编一起带你来了解一下这个强大的家族吧。

CHO细胞的背景

CHO细胞是中国仓鼠卵巢细胞（Chinese hamster ovary）的简称。

在民国时期1919年，北京协和医学院的E.T. Hsieh博士在进行医学研究时，初次发现野生的中国仓鼠的实验价值，于是进行饲养研究，准备训化它们成为实验动物品系。后经过多次实验驯养均失败。直到1949年Victor Schwentker经过两年的驯养，成功地把它变成一种实验室动物的品系。

 1957年，Puck实验室通过组织酶解消化技术成功分离出CHO细胞株，次年经过连续传代细胞重新克隆后建立完整的CHO原始细胞系。

  起初的CHO细胞系在培养时需要添加proline（脯氨酸）才能良好生长，虽然CHO细胞后来流转到各生物公司进行实验研究，但始终保留了脯氨酸缺陷型这一特性。

由于不同的实验环境及筛选培养方式的不同，CHO细胞在细胞形态、生长方式、表达方式、基因组、新陈代谢等方面也出现了差异化,逐渐演变成许多不同的细胞系。

CHO细胞的分类

目前常用的CHO细胞系主要有以下几种：

CHO-K1是1970由Puck实验室通过原始CHO细胞系进行亚克隆存放于ATCC（CCL-61）系列中。

随后在1985年通过ATCC CHO-K1亚克隆被分离并保存于ECACC（85051005）中，此时细胞系开始用于制药或重组蛋白的表达。CHO-K1细胞系的培养方式采用的是贴壁培养，并且需要在培养基中添加血清，才能保证细胞良好生长。

后来Lonza生物公司将ECACC CHO-K1通过多年改造训化，建立CHO K1SV（Lonza，2002）细胞株使其适应无血清培养基悬浮培养，被广泛应用在GS表达平台。

Merck公司在2006年通过ECACC获得CHO-K1细胞株，并进行悬浮驯化建立了CHOZN CHO K1（Merck，2006）细胞株，该细胞株可以生长在化学成分限定培养基中，降低了培养成本。基于CHO-K1的细胞系主要采用的蛋白筛选系统为GS（谷氨酰胺合成酶）和抗生素筛选系统在筛选效率上也有所提高。目前多个已经上市的治疗性蛋白多数是基于CHO-K1细胞进行开发生产的。

Thompson实验室在1973年通过原始CHO细胞系 分离并建立CHO-S细胞株，后Gibco公司将该细胞株驯化至CD CHO培养基中并建立了GMP细胞库，由于CHO-S因可以在无血清培养基中高密度悬浮培养，所以在早期常多用用瞬时表达宿主细胞。

除以上常用细胞外，还有单DHFR基因被敲除的CHO-DXB11细胞株也常用作宿主细胞；

Chasin实验室生产的CHO-DG44细胞株；

后来Lonza公司也于2012年推出CHO细胞 的GS双等位基因敲除的CHOK1SV GS-KO细胞株。进一步提升了筛选效率，缩短了稳定细胞株的开发周期，使细胞的克隆生产稳定性得以增强。

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