cho细胞-仓鼠卵巢细胞是于1957年从成年仓鼠的活组织切片中建立的一株细胞系。cho细胞大规模培养技术及其生物反应器工程可广泛应用于抗体、基因重组蛋白质药物、Virusvaccine 等生物技术产品的研究开发和工业化生产。

 cho细胞（ChineseHamsterOvarycells）是一种常用于重组蛋白生产的哺乳动物细胞系，而采用生物反应器补料分批培养技术（Fed-Batch）则是一种重要的工艺方法，用于优化cho细胞中重组蛋白的生产。本文将介绍cho细胞的优势、补料分批培养的特点和影响因素，以及不同营养物质对细胞生长和目的蛋白表达的影响。

在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞系中，观察到从乳酸生产(LP)到净乳酸消费(LC)的代谢转变。该转变通常会导致细胞生长、生产率、过程健壮性和可伸缩性的改进。本文通过两项补充研究进一步调查了乳酸代谢转移现象，发现铜浓度和细胞的乳酸代谢特性之间存在关联。一次性生物反应器培养，在LP条件下，细胞能量代谢效率较低，丙酮酸和乙酰可可不能进入TCA循环，导致能源效率下降。

摇瓶培养中适应乳酸和减少乳酸生产的研究结果表明，通过改变培养基成分和定期补充特定物质，可以使cho细胞系适应乳酸环境并减少乳酸的产量。细胞乳酸含量的测定可以使用德国EKF乳酸分析仪进行在线测量。

  近 80% 的CAR-T抗体由中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞产生。为了实现更好的细胞生长和高产重组蛋白，补料分批培养通常用于在 CHO 细胞中生产重组蛋白。根据营养物质消耗的需要，在细胞培养中加入含有多种成分的补料培养基，可以影响细胞生长特性，提高重组蛋白的产量和质量。补料分批优化应与 细胞培养环境参数、培养基 组成、补料策略等综合因素相 关联。

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  乳酸是cho细胞补料分批培养的主要副产品之一。在pH控制的生物反应器中，由于添加碱以控制细胞培养基的pH值，高水平乳酸的积累伴随着高渗透压，可能导致制造细胞生长缓慢，甚至大量凋亡，同时产生抗体蛋白的产量也降低不少。

丙酮酸羧化酶是细胞质和线粒体代谢途径的重要元素，可以有效促进能量代谢。在 cho细胞中过表达酵母胞质丙酮酸羧化酶(PYC2)，可以增加丙酮酸流向 TCA循环。增强的PYC2表达导致丙酮酸通量增加，从而使乳酸积累减少多达4倍，并显着增加细胞密度和培养寿命。

    cho细胞系之所以被广泛使用，主要因为它们是表达异源基因的稳定宿主，并且它们很容易适应无血清和无蛋白培养基中的粘附非依赖性生长。然而，在生物反应器中培养这种类型的细胞仍然有几个缺点。比如：细胞对主要碳源和能源（主要是葡萄糖和谷氨酰胺）的消耗率远高于支持细胞新陈代谢所严格要求的速率。

cho细胞是一种广泛用于生物制药蛋白质生产的宿主。cho细胞中分离外泌体主要采用聚合物的沉淀(PBP)技术从分批培养中分离和富集细胞外泌体囊泡。分离后的外泌体可以通过多种方法来检测和表征分离的囊泡，这些分析包括动态光散射(DLS)和Zeta电位测量、电子显微镜(EM)和外泌体标记物分析、RNA和脂质分析等。