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BCA蛋白定量法和Bradford蛋白定量的方法的比较

作者: 编辑: 来源: 发布日期: 2021.04.14
信息摘要:
目前实验室里常用的蛋白定量的方法通常主要有三种: BCA蛋白定量、Bradford蛋白定量法和紫外分光法。 

目前实验室里常用的蛋白定量的方法通常主要有三种: BCA蛋白定量、Bradford蛋白定量法和紫外分光法。 

BCA 蛋白定量 的实验原理是在碱性条件下,H | NH2----C-COOH | R 将Cu²+还原为CU+ BCA 结晶为紫色的化合物,再通过测定 562 nm波长OD来判定还原剂的含量。

下列表分别对两种实验方法做以对比:

BCA蛋白定量

通过上表中的的对比,我们不难看出Bradford实验法的速度比较快,平常BCA 蛋白定量 的孵育时间大约30分钟甚至更长,而采用Bradford蛋白定量法则需要几分钟即可完成实验。

虽然其标准曲线的线性拟合程度不如BCA定量法,但它的二项式契合度却较高。

(下图显示为:二项式的标准曲线制作方法)

蛋白定量 二项式

蛋白定量

除此之外,Bradford 蛋白定量还有一个小小的缺陷,那就是它比较容易受高浓度的去垢剂影响,比如需要SDS的实验浓度低于0.01%TRITON X-100的实验浓度低于0.005%等。

解决的办法是:使用与Bradford 兼容的去垢剂,从而匹配到相应的实验浓度即可。

Bradford蛋白定量实验虽然实验在制作二项式标线和公式计算较繁琐,但如果能成功破解以上三个问题,那么Bradford法对比BCA法来说还是有不少优势的,比如可以节省很多时间等。对于追求实验效率的实验员来说,熟练掌握Bradford实验法是个不错的选择。 


以上是对蛋白定量的两种方法做以简要对比,如有疑问欢迎致电0512-62956104 进行咨询。  苏州阿尔法生物 苏州阿尔法生物12年的生物仪器设备与耗材的行业经验,主要经营凝胶成像 , 微量天平 Pcr 检测仪、离心机、混匀仪、振荡培养箱、二氧化碳振荡培养箱、 微孔板振荡器、二氧化碳培养箱、微生物发酵罐。还可以关注更多阿尔法生物其他产品如:蛋白定量试剂、渗透压仪、电子天平、摇床、排枪移液器、涡混合、切胶仪、纯水机、电泳仪、溶剂过滤器、真空泵、超低温冰箱、离心管、实验室试剂盒、干细胞培养 等系列产品。部分仪器可以免费试用, 瑞宁移液器  类目可免费校准,免费出具  CNAS 报告。

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