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  • HEK293细胞转染
QuickShuttle-293 HEK293-细胞转染试剂
QuickShuttle 系列转染试剂中的QuickShuttle-293 细胞转染试剂属于阳离子转染试剂,具有高的效率、低毒和易于使用等特点,用于常规哺乳动物细胞系的瞬时转染和稳定细胞系构建。
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QuickShuttle-293 HEK293细胞转染试剂

QuickShuttle-293 HEK293细胞转染试剂


货号:KX0110044 

含量:0.8 m

l 用途:用于各种 293 细胞的瞬时转染和稳定细胞系构建(立传立转)。 

    QuickShuttle 系列转染试剂中的QuickShuttle-293 细胞转染试剂属于阳离子转染试剂,具有高的效率、低毒和易于使用等特点,用于常规哺乳动物细胞系的瞬时转染和稳定细胞系构建。

293细胞转染试剂的使用 注意事项:

 1. 质粒 DNA:请用能够去除内毒素的方法制备高质量的质粒 DNA。

 2. 稀释液:0.85%(W/V)生理盐水,用低内毒素纯水配制,高压消毒或除菌过滤。 

3. 培养基:经过 DMEM、RPMI-1640 和 M199 等常规培养基测试,推荐使用含 5~10%牛血清的 DMEM,若转染效果不理想可尝试其它培养基。

 4. 以 24 孔细胞板转染实验为例,推荐每孔低内毒素质粒 DNA 用量为 2µg、转染试剂用量为 3~5µl,请 在正式实验前根据不同细胞和不同培养基用报告基因进行优化。

 5. 立传立转要求使用生长旺盛的细胞,即细胞生长至 80-90%成片或刚长满。若使用生长过老的细胞, 将明显影响立传立转的效率。

 6. 立传立转对细胞状态要求较高,如果转染效果不理想,可按 QuickShuttle-Basic 的转染方法(详见说明 书的P3 页),在细胞贴壁后进行标准转染操作。 

293细胞转染试剂的使用方法 :

1. 将新鲜消化的 293 细胞接种到 24 孔细胞板中,每孔 1~2×105细胞,1ml 培养基。

备注:可在生长 旺盛的细胞传代后直接按下述步骤 2~5 进行转染实验,无需 18~24 小时的等候时间。 

2. 将 2μg 质粒 DNA 和 3~5μl 转染试剂分别稀释到 50μl 生理盐水中。

备注:质粒 DNA 和转染试剂的最 适用量需要根据不同培养基来优化,但理论上不超出 1~2µg 和 3~5µl 范围。 

3. 合并上述两溶液并混匀。备注:无需其它转染试剂所需的 10~30 分钟的等候时间。

4. 将上述复合物直接加入到细胞培养基中,用加样器吸打混匀。备注:转染复合物可直接加入含血清的 细胞培养基中进行转染。 

5. 将细胞板移至 37ºC/5% CO2 孵箱中进行培养。备注:无需在转染后 4~6 小时补加血清或更换培养 基。 

6. 24~72 小时后根据实验需要进行瞬时表达分析或稳定细胞系加压筛选。 

7 QuickShuttle-Hela 转染试剂适用于Hela 细胞。


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