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  • 抗体制备佐剂
QuickAntibody-Mouse5W-抗体制备佐剂-免疫佐剂
  与常规使用的弗氏佐剂相比,QuickAntibody免疫佐剂具有免疫周期短、针次少、无需乳化、抗原用量低、抗体滴度高、抗体亲合力高、易获得构象型表位的抗体等多方面特点。
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    QuickAntibody-Mouse5W-抗体制备佐剂-免疫佐剂


    QuickAntibody-Mouse5W用途

    通过5周2针的标准免疫程序制备小鼠单克隆和多克隆抗体,ELISA滴度(Cutoff值为0.1000)可达到1:10000-1:10000000。
     
    QuickAntibody-Mouse5W 使用方法(详见使用说明书) 
         
    1.    用生理盐水将抗原稀释到2倍终浓度(按每针次50μl用量配制)。

    备注:推荐使用的抗原用量为

    (1)免疫原性较强的灭活全  virus 或全细菌以及  virus 样颗粒抗原每针次1-5μg;

    (2)免疫原性较弱的亚单位蛋白抗原每针次5-20μg;

    (3)偶联了载体蛋白的小分子抗原每针次20-50μg。

    2.    充分混匀佐剂,无菌条件下取出所需用量(按每针次50μl)与抗原按体积比1:1迅速混匀。

    备注:本佐剂产生沉淀属正常现象,与抗原混合操作越快越好。

    3.    通过后腿小腿肌肉注射免疫小鼠( 视频),每只小鼠注射100μl。

    备注:本佐剂与抗原混合后产生沉淀属正常现象,抽入针管前应充分混匀,抽入针管后应尽快注射。

    4.    第21天按同样方式加强免疫1针。

    备注:每次佐剂和抗原现配现用。

    5.    第35天采微量尾血进行ELISA测定,抗体滴度应在1:10000-1:10000000范围内,随后即可采全血或按常规方法进行抗原冲击免疫和脾细胞融合。

    如何选择 QuickAntibody 系列免疫佐剂?

    QuickAntibody系列免疫佐剂属于一种新型免疫佐剂,分别用于制备小鼠单克隆和多克隆抗体(见下表)。

      产品名称 货号 规格 免疫周期 特点 用途 预期滴度
      QuickAntibody
      -Mouse5W
      KX0210041 1ml 5周 标准免疫
      小鼠单抗
      小鼠多抗
      1:10000-
      1:10000000
      QuickAntibody
      -Mouse3W
      KX0210042 1ml 3周 快速免疫
      小鼠单抗
      小鼠多抗
      1:10000-
      1:100000
      QuickAntibody
      -Mouse2W
      KX0210043 1ml 2周 快速免疫 小鼠多抗
      1:1000-
      1:10000
      QuickAntibody
      -Rabbit8W
      KX0210045 1ml 8周 标准免疫 兔多抗
      1:10000-
      1:1000000 



      QuickAntibody系列免疫佐剂有哪些特点?

          与常规使用的弗氏佐剂相比,QuickAntibody免疫佐剂具有免疫周期短、针次少、无需乳化、抗原用量低、抗体滴度高、抗体亲合力高、易获得构象型表位的抗体等多方面特点,详述如下:

      1.    QuickAntibody只需两针免疫,无论是用于单克隆还是多克隆抗体制备,与弗氏佐剂相比可减少免疫针次。

      2.    QuickAntibody通过减少免疫针次和降低每针次抗原用量,从而可大大节省总抗原用量。

      推荐使用的抗原用量为(1)免疫原性较弱的亚单位蛋白抗原每针次5-50μg(通常为小鼠5-20μg,兔子20-50μg);

      (2)免疫原性较强的灭活全病毒或全细菌以及病毒样颗粒抗原每针次1-10μg(通常为小鼠1-5μg ,兔子5-10μg)。


      3.    QuickAntibody抗体产生快,抗体滴度高,抗体亲合力高。以标准免疫程序为例,无论是用于单克隆还是多克隆抗体制备,只需要在三周内进行两针免疫,通常在第五周即可获得ELISA滴度(Cutoff值为0.1000)高达1:10000-1:10000000的高亲合力抗体水平。

      4.    QuickAntibody不破坏抗原天然构象,从而易于筛选获得针对构象型抗原表位的单克隆抗体,这是弗氏佐剂所不具备的一个重要特点。

      5.    QuickAntibody是水溶性佐剂,使用时不需要弗氏佐剂的复杂乳化过程,抗原和佐剂只需简单混合即可免疫动物。

      6.    QuickAntibody使用肌肉免疫途径,与常规小鼠单克隆抗体制备过程中使用足垫或脾内免疫相比,极大方便了使用。

      7.    QuickAntibody的一个重要用途是可方便地用于制备小鼠多克隆抗体。常规多克隆抗体制备多使用兔子,不但免疫针次多、抗原用量大和抗体产生慢,而且由于技术要求较高而往往需要委托第三方单位制备。

       使用QuickAntibody免疫佐剂,任何实验动物人员均可方便快速地制备小鼠多克隆抗体,标准免疫程序只需要简单地免疫5只小鼠,即可在五周后获得1ml高质量的小鼠多克隆抗体。(推荐使用本佐剂制备小鼠多克隆抗体,1ml高质量的小鼠多克隆抗体足以满足绝大多数用户的实验需求,包括用于酶联免疫、免疫印迹、流式细胞、免疫组化和免疫沉淀等)。

      8.    QuickAntibody建议常温运输,2~8ºC保存,无菌取用,有效期18个月。
     


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