苏州阿尔法生物实验器材有限公司

13年专注生物实验室仪器设备&耗材综合供应

0512-6295610418934597460

阿尔法构建全服务链体系 尊享高于原厂服务的价值
摇瓶-微生物种子制备工艺
信息摘要:
摇瓶种子即接种在摇瓶内用于摇瓶发酵试验或发酵罐生产的微生物菌种。

标签:摇瓶 缓冲液 微生物 种子制备

摇瓶种子即接种在摇瓶内用于摇瓶发酵试验或发酵罐生产的微生物菌种。用于接种传代第一代的种子称为“母瓶”,用于接种传代第二代的种子就叫做“子瓶”。 “母瓶”和“子瓶”均可应用在微生物发酵罐进行规模扩培传代培养。摇瓶

一、培养基制备
在摇瓶中进行种子制备的主要目标是培养强生长活性的营养菌体,所以在配制培养基阶段必须以满足菌体生长要求为目的。比如在培养基中添加足量的营养物质,包括碳、氮源、缓冲液、无机盐和生长因子等物质。在培养基中添加缓冲液的主要作用是调节培养基中的PH值,是培养基的PH环境长期处于稳定状态。常用的PH调节剂主要有磷酸盐缓冲液、PBS缓冲液等。培养基分装完成,封口后需要置于高压灭菌锅中进行高压灭菌。 灭菌完成后缓慢降压,防止因气压骤降造成培养基冲击瓶塞。

二、种子接种

在进行摇瓶种子接种时,普遍采用的是斜面法或米孢子粒计数接入的方式。 如果采用米孢子粒计数接入接种法进行接种的缺陷在于,接种量的一致性很难掌握,这样容易导致摇瓶种子的质量稳定性差。因此,对于接种量较为敏感的菌种,一般会采用悬液接种法进行接种。悬液接种法是用蒸馏水将细胞或微生物孢子洗脱成为混合液,然后按固定体积数量接种在摇瓶种子培养基中的一种接种方法。悬液接种法增加了接种数量的均一、稳定性。 

三、振荡培养 

 摇瓶种子采用的振荡培养摇床主要有旋转式振荡和往复式振荡两种。正常情况下生产抗生素类的企业使用较多的是旋转式振荡摇床。旋转式振荡摇床由于在主轴和从动轴间会有25mm-50mm左右的偏心距产生,所以在振荡作用时更有利于气体交换。部分特殊的微生物也会使用振荡培养箱进行培养。 

四、收获保存 

摇瓶种子在培养完成后尽量立即使用。如果临时用不到的可放在4℃冰箱中保存,但是保存期以不超过3天为宜。为避免影响生产质量,这类冷藏处理的种子多数用于摇瓶发酵试验或小型发酵罐实验,一般不直接做生产用种子。

五、影响摇瓶种子的质量

影响微生物摇瓶种子质量的因素主要有:菌体浓度、培养基成分、接种密度、设备转速等。 

苏州阿尔法阿尔法生物实验器材有限公司十三年来一直专注于生物科学领域的仪器设备及实验耗材的供应,在苏南市场具有较高的影响力,主要供应细胞培养板、细胞培养瓶、摇瓶、离心管、pcr管、移液枪吸头等千余种实验室试剂耗材,同时与80余家生产品牌厂商深度合作,所供应包括摇床、生物反应器、发酵罐、移液器、PCR仪、低温冰箱等100多种实验室仪器设备。

阿尔法推荐资讯

我们正青春

我们正青春

时值青春我们有什么资格不努力?风华正茂我们有什么理由不奋起?!
2021-09-30
瑞宁移液器吸头促销—开学季大礼包

瑞宁移液器吸头促销—开学季大礼包

瑞宁移液器开学季促销:买三送一,买十送一。
2021-08-31
化学发光免疫分析诊断技术前景如何?

化学发光免疫分析诊断技术前景如何?

苏州阿尔法生物实验器材有限公司作为实验室仪器设备及实验耗材专业供应商,常年提供化学发光免疫方面的配套仪器、检测设备及相关配套试剂,如需了解更多请0512-62956104或18934597460进行咨询。
2021-07-06

咨询热线

0512-62956104